血栓弹力图激活剂F质控品及其制备方法与流程

测量装置的制造及其应用技术血栓弹力图激活剂f质控品及其制备方法技术领域1.本发明涉及凝血检验质量控制技术领域，具体涉及血栓弹力图激活剂f质控品及其制备方法。背景技术：2.血栓弹力图是由血栓弹性描记仪描记的凝血动态过程曲线，是一种能动态分析凝血形成和纤维蛋白溶解全过程的曲线图。血栓弹力图于1948年由hartert发明，20世纪80年代中后期开始应用于临床，现已成为围手术期监测凝血功能的重要指标，并已广泛应用于肝移植、心脏外科、肾移植、创伤外科等诸多领域，指导围手术期的血液输注、溶栓及抗凝治疗等。血栓弹力图仪可联合激活剂f(主要含巴曲酶、十三因子等)、adp(二磷酸腺苷)、aa(花生四烯酸)等激活剂绘制出血小板图，监测纤维蛋白原、二磷酸腺苷、花生四烯酸等途径，评估抗血小板药物疗效，临床上可快速识别和发现创伤中高危患者。3.由检测设备(血栓弹力图仪)和配套检测试剂共同组成血小板图检测系统，对临床样本进行检测。在用血小板图检测系统检测临床样本前，需先用合适的质控品评估该检测系统(设备+配套试剂)是否处于正常状态，以保证临床样本检测结果的可靠性。目前市场上尚无稳定、可靠的血小板图检测系统质控品，因此开发出适用于该检测系统的质控品十分必要。技术实现要素：4.本发明意在提供血栓弹力图激活剂f质控品，以解决现有技术中尚无适用于血小板图检测系统的质控品的技术问题。5.为达到上述目的，本发明采用如下技术方案：6.血栓弹力图激活剂f质控品，其原料包括由肝素抗凝血浆基质液和肝素抗凝纤维蛋白原基质液组成的凝固主体以及冻干保护剂；所述冻干保护剂中含有四氢嘧啶。7.本方案还提供了一种血栓弹力图激活剂f质控品的制备方法，包括以下依次进行的步骤：8.s1：将肝素抗凝血浆基质液和肝素抗凝纤维蛋白原基质液混合，并调整ma值至第一设定范围，获得凝固主体；9.s2：在凝固主体中加入冻干保护剂，并调整ma值至第二设定范围，获得待冻干品；10.s3：待冻干品经冻干处理后获得血栓弹力图激活剂f质控品。11.本方案的原理及优点是：质控品通常是使用在实际样品检测之前，以确定检测系统的稳定性，从而保证实际样品检测结果的准确性。目前市场尚无适用于血小板图检测系统的质控品，本方案的质控品可以实现对包括血栓弹力图仪、激活剂f形成的血小板图检测系统的质量控制。12.现有技术中，制备血栓弹力图仪用质控品，通常是将抗凝猪血分离为纤维蛋白原基质液和血浆基质液，从而调配出不同的性能的质控品。并且为了保证质控品的长期有效性和运输的方便性，我们通常在质控品中加入ph缓冲剂、蛋白质保护剂和防腐剂，然后再进行冻干处理。但是，发明人在制作血栓弹力图激活剂f质控品的时候，发现按照常规方式制作，获得的质控的稳定性欠佳。主要表现在产品检测结果波动较大(即cv值较大)，产品稳定性较差(详见对比例1的实验数据)。发明人通过对质控品配方案进行大量的筛选和改进，发现额外计入四氢嘧啶作为溶液稳定剂，获得的质控品更加稳定，可以满足应用需求(详见对比例2的实验数据)。13.进一步，所述冻干保护剂和所述凝固主体的体积比为25.1～65.1：1000。采用上述比例的冻干保护剂和凝固主体，可保证质控品质量稳定。14.进一步，所述四氢嘧啶和所述凝固主体的用量比为10～20mmol：1000ml。15.四氢嘧啶的用量对于保证质控品的稳定性非常关键，尤其当1m四氢嘧啶溶液用量为每1000ml凝固主体10～20mmol四氢嘧啶时，其检测结果的cv值(不精密度)较小(详见对比例3的实验数据)，产品可在2～8℃稳定保存12个月。16.进一步，所述冻干保护剂包括体积比为0.5～1.5：1～3：0.01：1～2的ph缓冲剂、蛋白质保护剂、防腐剂和四氢嘧啶溶液。17.采用上述技术方案，蛋白质保护剂起到保护质控品中的蛋白质物质的作用；ph缓冲剂可为质控品中的各种生物分子提供稳定的ph环境以及维持一定的盐离子浓度，维持质控品中的生物分子活性状态；防腐剂的使用可以防止质控品腐败，延长质控品的保质期。18.进一步，所述蛋白质保护剂包括牛血清白蛋白、蔗糖、海藻糖、甘氨酸、甘露醇和乳糖中的至少一种；所述ph缓冲剂为hepes缓冲剂、tris-hcl缓冲剂和磷酸盐缓冲剂中的一种；所述防腐剂为proclin 300、叠氮化钠和苯甲酸钠中的一种。上述蛋白质保护剂、ph缓冲剂和防腐剂为现有技术中常规的试剂，性质稳定且成本适中。19.进一步，凝固主体的ma值为18.0～22.0mm；将凝固主体和冻干保护剂混合后形成待冻干品，待冻干品的ma值为8.0～12.0mm。20.在本方案中，ma值在8.0～12.0mm范围内的质控品可作为血栓弹力图激活剂f质控品水平1使用，血栓弹力图激活剂f质控品水平1可模拟正常凝血状态，并对含有血栓弹力图仪和配套试剂的血小板图检测系统进行质控。21.进一步，凝固主体的ma值为30.0～40.0mm；将凝固主体和冻干保护剂混合后形成待冻干品，待冻干品的ma值为15.0～25.0mm。22.在本方案中，ma值在15.0～25.0mm范围内的质控品可作为血栓弹力图激活剂f质控品水平2使用，血栓弹力图激活剂f质控品水平2可模拟异常凝血状态，并对含有血栓弹力图仪和配套试剂的血小板图检测系统进行质控。23.进一步，当血栓弹力图激活剂f质控品为水平1时，第一设定范围为18.0～22.0mm，第二设定范围为8.0～12.0mm；24.当血栓弹力图激活剂f质控品为水平2时，第一设定范围为30.0～40.0mm，第二设定范围为15.0～25.0mm。25.采用上述方案，通过控制ma值可以实现两种水平的质控品的制备。制备的血栓弹力图质控品水平1和血栓弹力图质控品水平2分别反映了实际样品的正常凝血和异常凝血两种状态。可实现血小板图检测系统针对于正常凝血样品的检测效力的质控，以及实现血小板图检测系统针对于异常凝血样品的检测效力的质控。26.进一步，肝素抗凝猪血浆基质液和肝素抗凝纤维蛋白原基质液由如下方法制备：在新鲜猪全血中加入肝素钠抗凝剂，获得肝素抗凝猪血；经静置分层取上层液体、离心取上层液体后，加入叠氮化钠，获得肝素抗凝猪血浆；对肝素抗凝猪血浆进行离心处理，获得位于上层的肝素抗凝血浆基质液和位于下层的肝素抗凝纤维蛋白原基质液。27.采用上述技术方案，可以从猪血中分离得到纤维蛋白原基质液和血浆基质液，上述操作过程简单且易于工业化，并且本方案以猪血为主要原料，来源充足，成本较低。28.综上所述，本方案的综合有益效果如下：29.在对样品进行血栓弹力图检测时，需要使用到检测设备(血栓弹力图仪)、配套试剂。针对检测设备、配套试剂组成的血小板图检测系统，需要定期进行质控，以确保检测结果的准确性。本方案的血栓弹力图激活剂f质控品涵盖临床正常凝血、异常凝血等状态，模拟临床实际检测环境，与血栓弹力图仪、配套试剂联合使用，能对血小板图检测系统进行质量控制或检测系统评估，保证临床样本检测结果的可靠性。30.目前，市场尚无适用于血小板图检测系统的质控品，就无法评估该检测系统是否处于正常状态，也不能保证临床样本检测结果的可靠性。本方案克服现有技术的缺陷，提供了一种能模拟临床实际检测环境，涵盖临床正常凝血、异常凝血的血栓弹力图激活剂f质控品。用户可方便对血小板图检测系统进行质量控制或检测系统评估，保证临床样本检测结果的可靠性。本发明以猪血为主要原料，来源充足，成本较低；本发明制备工艺简单、产品稳定、易于工业化生产。附图说明31.图1为本发明实施例1的表1结果1的检测图谱。32.图2为本发明实施例1的表2结果1的检测图谱。33.图3为本发明实施例2的表3结果1的检测图谱。34.图4为本发明实施例2的表4结果1的检测图谱。35.图5为本发明对比例1的表5结果1的检测图谱。具体实施方式36.下面结合实施例对本发明做进一步详细的说明，但本发明的实施方式不限于此。若未特别指明，下述实施例所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段；所用的实验方法均为常规方法；所用的材料、试剂等，均可从商业途径得到。37.本方案实施例和对比例中，涉及到的主要检测仪器、配套试剂、原料信息如下：38.drnx‑ⅲ型血栓弹力图仪：重庆鼎润医疗器械有限责任公司；血栓弹力图试验试剂激活剂f(凝固法)：重庆鼎润医疗器械有限责任公司(注册号：渝械注准201902400194)；抗凝猪血：重庆沙格生态农业开发有限公司；蔗糖：国药集团化学试剂有限公司；甘氨酸：国药集团化学试剂有限公司；氯化钠：国药集团化学试剂有限公司；柠檬酸钠二水物：国药集团化学试剂有限公司；proclin 300：sigma；叠氮化钠：sigma；1m hepes：北京索莱宝科技有限公司；四氢嘧啶：南京春秋生物工程有限公司；纤维蛋白原基质液：重庆鼎润医疗器械有限责任公司；血浆基质液：重庆鼎润医疗器械有限责任公司。39.实施例1：血栓弹力图激活剂f质控品水平1(正常值质控品)40.1.肝素抗凝血浆基质液与肝素抗凝纤维蛋白原基质液的制备41.(1)肝素抗凝猪血的采集：在生猪屠宰时，按新鲜猪全血与200u/ml肝素钠抗凝剂的体积比为9：1混合，采集肝素抗凝猪血。42.(2)肝素抗凝猪血浆的制备：收集的肝素抗凝猪血，室温放置3～6小时，静置分层。吸取上层液体，放入管式离心机离心，设置离心参数：转速4500rpm，时间15min，温度4℃。离心后小心吸出上层清液，加入终浓度为0.02％的叠氮化钠防腐剂，得肝素抗凝猪血浆，-20～-30℃冷冻保存(有效期3年)。下层主要为红细胞，按医疗垃圾废物处理。43.(3)肝素抗凝猪血浆基质液(简称：血浆基质液)与肝素抗凝纤维蛋白原基质液(简称：纤维蛋白原基质液)，两者均为重庆鼎润医疗器械有限责任公司的自制品，其制备过程具体如下：将已冻成坚硬冰块状的肝素抗凝猪血浆，置于2～8℃环境，缓慢解冻，至尚存少许碎冰块。肝素抗凝猪血浆放入管式离心机离心，设置离心参数：转速4500rpm，时间15min，温度4℃。离心后，小心吸出肝素抗凝血浆基质液，-20～-30℃冷冻保存(有效期3年)；收集下层即为肝素抗凝纤维蛋白原基质液，-20～-30℃冷冻保存(有效期3年)。44.2.制备血栓弹力图激活剂f质控品水平145.(1)取出已冷冻的肝素抗凝纤维蛋白原基质液，置于37±2℃水浴锅中快速解冻。取解冻后的200ml肝素抗凝纤维蛋白原基质液加入1000ml烧杯中，再加入800ml肝素抗凝血浆基质液，得初始混合液。在本步骤中，肝素抗凝纤维蛋白原基质液和肝素抗凝血浆基质液的比例可控制在15～25：75～85，这样在后续调整过程中，可以更为容易的将ma值调整到18.0～22.0mm范围内。46.(2)取初始混合液，用血栓弹力图仪(如drnx‑ⅲ)及配套试剂(血栓弹力图试验试剂激活剂f(凝固法))检测，要求ma值在18.0～22.0mm范围内，获得溶液a1；当ma值＜18.0mm时，加入适量肝素抗凝纤维蛋白原基质液；当ma值＞22.0mm时，加入适量肝素抗凝血浆基质液。47.(3)在1000ml的ma值在18.0～22.0mm范围内的溶液a1中加入10ml 1m hepes溶液(ph缓冲剂，ph值为7.2)、10ml 1m蔗糖溶液(蛋白质保护剂)、10ml 1m甘氨酸溶液(蛋白质保护剂)、0.1ml proclin300(防腐剂)、15ml 1m四氢嘧啶溶液(溶液稳定剂)，得溶液b1，共加入45.1ml冻干保护剂(ph缓冲剂、蛋白质保护剂、防腐剂和溶液稳定剂)。48.在本方案中，ph缓冲剂可选用hepes、tris-hcl和磷酸盐缓冲剂中的一种，ph缓冲剂的ph值为7.0～7.5，浓度为1m；ph缓冲剂的使用量(以体积百分数表示)为溶液a1的0.5～1.5％。蛋白质保护剂可选牛血清白蛋白、蔗糖、海藻糖、甘氨酸、甘露醇、乳糖中的至少一种作为原料，制备为浓度为1m的溶液；蛋白质保护剂的使用量(以体积百分数表示)为溶液a1的1～3％。防腐剂可选择proclin 300、叠氮化钠和苯甲酸钠中的一种，防腐剂的使用量(以体积(防腐剂为液体时)或重量(防腐剂为固体时)百分数表示)为溶液a1的0.01％。溶液稳定剂为四氢嘧啶溶液，浓度为1m；溶液稳定剂的使用量(以体积百分数表示)为溶液a1的1～2％。采用上述用量条件均可制备符合本方案要求的血栓弹力图激活剂f质控品。其中，冻干保护剂包括蛋白质保护剂、ph缓冲剂、防腐剂和溶液稳定剂，冻干保护剂的用量(以体积或重量百分数表示)为溶液a1的2.51～6.51％。49.(4)取溶液b1，用血栓弹力图仪及配套试剂检测，要求ma值在8.0～12.0mm范围内；当ma值＜8.0mm时，加入适量肝素抗凝纤维蛋白原基质液；当ma值＞12.0mm时，加入适量肝素抗凝血浆基质液。调整结束后获得，ma值在8.0～12.0mm范围内的溶液b1。50.(5)ma值在8.0～12.0mm范围内的溶液b1，按每瓶1ml进行分装，经常规冻干40小时，得血栓弹力图激活剂f质控品水平1冻干品，在2～8℃密闭保存，有效期12月。每瓶血栓弹力图激活剂f质控品水平1含有1ml原液(ma值在8.0～12.0mm范围内的溶液b1)，经冻干获得。1ml原液大致含有0.19ml肝素抗凝纤维蛋白原基质液(200ml/(200ml+800ml+45.1ml))、0.76ml肝素抗凝血浆基质液(800ml/(200ml+800ml+45.1ml))和0.04ml冻干保护剂(45.1ml/(200ml+800ml+45.1ml))。使用时，每瓶冻干品加入1ml纯化水复溶得其复溶液。51.3.血栓弹力图激活剂f质控品水平1的性能检测52.检测方法：按照“血栓弹力图试验试剂激活剂f(凝固法)说明书”，在样品杯中加入10μl激活剂f检测试剂(血栓弹力图试验试剂激活剂f(凝固法))，再加入360μl质控品复溶液(每瓶质控品加入1ml纯化水复溶)，吹吸混匀3次，启动检测。53.外观：产品为类白色或淡黄色固体，复溶后为无色或淡黄色液体。54.均匀性：用血栓弹力图仪(如drnx‑ⅲ)及血栓弹力图试验试剂激活剂f(凝固法)，按照“血栓弹力图试验试剂激活剂f(凝固法)说明书”进行检测，检测结果见表1，在表1中“结果1”的检测图谱见图1。由检测结果可知，血栓弹力图质控品水平1的ma值变异系数(cv)较小，符合要求(要求ma值的变异系数(cv)应≤15％)。55.表1：血栓弹力图激活剂f质控品水平1的性能检测结果56.检测参数ma值(mm)结果111.4结果212.3结果312.1结果410.1结果512.1结果69.4结果710.4结果810.3结果910.8结果1010.9cv8.9％57.4.血栓弹力图激活剂f质控品水平1稳定性检测58.产品在2～8℃密闭保存12月后，用血栓弹力图仪(如drnx‑ⅲ)及血栓弹力图试验试剂激活剂f(凝固法)检测，结果如表2。“结果1”的第12个月的检测图谱见图2。检测结果显示本方案获得的血栓弹力图激活剂f质控品水平1性质稳定性，在保存12个月之后，仍然具有检测效力(要求相对偏差应≤15％)。第12个月相对偏差＝(第12个月检测均值-第0个月检测均值)/第0个月检测均值×100％。59.表2：血栓弹力图激活剂f质控品水平1稳定性检测结果[0060][0061]实施例2：血栓弹力图激活剂f质控品水平2(异常值质控品)[0062]1.制备血栓弹力图激活剂f质控品水平2[0063](1)取出已冷冻的肝素抗凝纤维蛋白原基质液，置于37±2℃水浴锅中快速解冻。取解冻后的140ml肝素抗凝纤维蛋白原基质液加入1000ml烧杯中，再加入860ml肝素抗凝血浆基质液，得溶液a2。在本步骤中，肝素抗凝纤维蛋白原基质液和肝素抗凝血浆基质液的比例可控制在9～19：81～91，这样在后续调整过程中，可以更为容易的将ma值调整到30.0～40.0mm范围内。[0064](2)取溶液a2，用血栓弹力图仪(如drnx‑ⅲ)及配套试剂(血栓弹力图试验试剂激活剂f(凝固法))检测，要求ma值在30.0～40.0mm范围内；当ma值＜30.0mm时，加入适量肝素抗凝纤维蛋白原基质液；当ma值＞40.0mm时，加入适量肝素抗凝血浆基质液。[0065](3)在1000ml的ma值在30.0～40.0mm范围内的溶液a2中加入10ml 1m hepes溶液(ph缓冲剂)、10ml 1m蔗糖溶液(蛋白质保护剂)、10ml 1m甘氨酸溶液(蛋白质保护剂)、0.1ml proclin300(防腐剂)、15ml 1m四氢嘧啶溶液(溶液稳定剂)，得溶液b2。[0066]在本方案中，ph缓冲剂可选用hepes、tris-hcl和磷酸盐缓冲剂中的一种，ph缓冲剂的ph值为7.0～7.5，浓度为1m；ph缓冲剂的使用量(以体积百分数表示)为溶液a2的0.5～1.5％。蛋白质保护剂可选牛血清白蛋白、蔗糖、海藻糖、甘氨酸、甘露醇、乳糖中的至少一种，浓度为1m；蛋白质保护剂的使用量(以体积百分数表示)为溶液a2的1～3％。防腐剂可选择proclin 300、叠氮化钠和苯甲酸钠中的一种，防腐剂的使用量(以体积或重量百分数表示)为溶液a2的0.01％。溶液稳定剂为四氢嘧啶，浓度为1m；溶液稳定剂的使用量(以体积百分数表示)为溶液a1的1～2％。采用上述用量条件均可制备符合本方案要求的血栓弹力图激活剂f质控品。其中，冻干保护剂包括蛋白质保护剂、ph缓冲剂、防腐剂和溶液稳定剂，冻干保护剂的用量(以体积或重量百分数表示)为溶液a1的2.51～6.51％。[0067](4)取溶液b2，用血栓弹力图仪及配套试剂检测，要求ma值在15.0～25.0mm范围内；当ma值＜15.0mm时，加入适量肝素抗凝纤维蛋白原基质液；当ma值＞25.0mm时，加入适量肝素抗凝血浆基质液。调整结束后获得，ma值在15.0～25.0mm范围内的溶液b2。[0068](5)ma值在15.0～25.0mm范围内的溶液b2，按每瓶1ml进行分装，经常规冻干40小时，得血栓弹力图激活剂f质控品水平2冻干品，在2～8℃密闭保存，有效期12月。每瓶血栓弹力图激活剂f质控品水平2含有1ml原液(ma值在15.0～25.0mm范围内的溶液b2)，经冻干获得。1ml原液大致含有0.13ml肝素抗凝纤维蛋白原基质液(140ml/(140ml+860ml+45.1ml))、0.82ml肝素抗凝血浆基质液(860ml/(140ml+860ml+45.1ml))和0.04ml冻干保护剂(45.1ml/(140ml+860ml+45.1ml))。使用时，每瓶冻干品加入1ml纯化水复溶得其复溶液。[0069]2.血栓弹力图激活剂f质控品水平2的性能检测[0070]检测方法：同“血栓弹力图激活剂f质控品水平1的性能检测”描述的检测方法。[0071]外观：产品为类白色或淡黄色固体，复溶后为无色或淡黄色液体。[0072]均匀性：用血栓弹力图仪(如drnx‑ⅲ)及血栓弹力图试验试剂激活剂f(凝固法)，按照“血栓弹力图试验试剂激活剂f(凝固法)说明书”进行检测，检测结果见表3，在表3中“结果1”的检测图谱见图3。由检测结果可知，血栓弹力图质控品水平2的ma值变异系数(cv)较小，符合要求(要求ma值的变异系数(cv)应≤15％)。[0073]表3：血栓弹力图激活剂f质控品水平2的性能检测结果[0074]检测参数ma值(mm)结果120.3结果216.8结果320.2结果417.0结果519.4结果618.9结果719.0结果819.0结果919.3结果1019.4cv6.2％[0075]3.血栓弹力图激活剂f质控品水平2稳定性检测[0076]产品在2～8℃密闭保存12月后，用血栓弹力图仪(如drnx‑ⅲ)及血栓弹力图试验试剂激活剂f(凝固法)检测，结果如表4。“结果1”的第12个月的检测图谱见图4。检测结果显示本方案获得的血栓弹力图激活剂f质控品水平2性质稳定性，在保存12个月之后，仍然具有检测效力(要求相对偏差应≤15％)。[0077]表4：血栓弹力图激活剂f质控品水平2稳定性检测结果[0078][0079][0080]对比例1：[0081]本对比例研究了不使用四氢嘧啶溶液对于质控品的制备的效果。现以制备血栓弹力图质控品水平1的情况为例进行说明，按照实施例1的制备方法获得血栓弹力图激活剂f质控品水平1，并在制备的过程中不使用四氢嘧啶，对获得的质控品进行血栓弹力图仪检测，实验结果参见表5，“结果1”参见图5。实验结果显示，不加入四氢嘧啶溶液时，产品的稳定性较差，其检测结果的cv值(不精密度)较大。[0082]表5：血栓弹力图激活剂f质控品水平1的性能检测结果[0083]检测参数ma值(mm)结果114.0结果210.4结果310.4结果48.7结果511.4结果611.0结果716.0结果88.8结果912.0结果1010.1cv20.1％[0084]本方案意在研究开发一种特别针对于“血栓弹力图仪+血栓弹力图试验试剂激活剂f(凝固法)”的血小板图检测系统的质控品。现有技术中，血栓弹力图相关质控品通常使用抗凝猪血来配置，将抗凝猪血分离为纤维蛋白原基质液和血浆基质液，从而调配出不同的ma值的质控品。并且为了保证质控品的长期有效性和运输的方便性，我们通常在质控品中加入ph缓冲剂、蛋白质保护剂和防腐剂，然后再进行冻干处理。在申请人的在先申请的发明专利中(cn113325185a多水平质控品及其制备方法和在血栓弹力图检测上的应用)，采用了上述手段制备了针对于“血栓弹力图仪+血栓弹力图试验(活化凝血)试剂(凝固法)”的质控品。该质控品的cv值(不精密度)较为理想，于是，发明人将在该专利的方法转用到本方案的场景中。发明人首先尝试了本对比例的操作方法，发现在本方案的特定的应用情形下，质控品的cv值(不精密度)非常不理想，不能用于评价“血栓弹力图仪+血栓弹力图试验试剂激活剂f(凝固法)”的血小板图检测系统是否处于正常状态。说明针对于不同的检测试剂，为保证质控品的稳定性，需要采用不同的处理方法，发明人进而对如何提升血栓弹力图激活剂f质控品的稳定性降低cv值进行了更深入的研究。[0085]对比例2：[0086]本对比例研究了不同稳定剂对于质控品的制备的效果。现以制备血栓弹力图质控品水平1的情况为例进行说明，按照实施例1的制备方法获得血栓弹力图激活剂f质控品水平1，并在制备的过程中将四氢嘧啶分别更换为三羟甲基氨基甲烷盐酸盐、磷酸盐缓冲液和牛血清白蛋白(分别对应表6中的1-3，暂时将这三种物质称为用于替代的稳定剂)，获得作为对比的质控品。表6的“4”对应的是实施例1获得的质控品。对获得的质控品进行血栓弹力图仪检测，实验结果参见表6。表6中对应的cv值是该组质控品的10个ma值的不精密度。实验结果显示，加入三羟甲基氨基甲烷盐酸盐、磷酸盐缓冲液、牛血清白蛋白等稳定剂时，产品的稳定性较差，其检测结果的cv值(不精密度)较大；而加入适量的四氢嘧啶，其检测结果的cv值(不精密度)较小。[0087]表6：使用不同稳定剂的样品cv值检测结果[0088][0089]为了研究如何能够增加质控品的稳定性的方法，发明人进行了大量尝试，包括增加ph缓冲剂的浓度、增加蛋白保护剂的浓度等方式。例如，在实施例1的基础上，发明人尝试将hepes溶液的用量增加，以及额外增加其他类型的缓冲液(如：磷酸盐缓冲液、tris-hcl缓冲液、三羟甲基氨基甲烷盐酸盐溶液)；发明人还尝试了将蔗糖溶液和/或甘氨酸溶液的用量增加，以及额外再加入新的蛋白质保护剂(如：牛血清白蛋白、海藻糖、甘露醇和乳糖)等，结果均不太理想，检测结果的cv值均大于14％，不符合应用需求。上表(表6的1-3)中仅展示了三种尝试过的不理想情形，通过额外加入三羟甲基氨基甲烷盐酸盐溶液、磷酸盐缓冲液和牛血清白蛋白的手段来尝试提升质控品的稳定性。需要说明的是，表6的1-3的实验结果均是使用上述三种物质的最佳cv值，即三羟甲基氨基甲烷盐酸盐溶液、磷酸盐缓冲液和牛血清白蛋白分别在添加量为2vol.％、2vol.％和3wt.％时，获得的cv值最小。表6的实验结果显示1-3的尝试结果并不理想，只有在使用四氢嘧啶溶液的时候，才能获得最为理想的检测效果。[0090]对比例3：[0091]本对比例研究了四氢嘧啶的用量对于质控品的制备的效果。现以制备血栓弹力图质控品水平1的情况为例进行说明，按照实施例1的制备方法获得血栓弹力图激活剂f质控品水平1，并在制备的过程中使用不同用量的四氢嘧啶，对获得的质控品进行血栓弹力图仪检测，实验结果参见表7。表7中对应的cv值是该组质控品的10个ma值的不精密度。实验结果显示，当四氢嘧啶用量为1～2％，其检测结果的cv值(不精密度)较小。[0092]表7：使用不同量四氢嘧啶的样品cv值检测结果[0093]1m四氢嘧啶溶液(体积百分数)检测结果的cv值0.1％14.5％1％8.9％1.5％8.1％2％7.5％3％10.2％4％12.4％[0094]以上对比例均以血栓弹力图激活剂f质控品水平1进行示例，实际上采用血栓弹力图激活剂f质控品水平2时也存在上述规律。即使用用量为1～2％四氢嘧啶溶液作为稳定剂，所获得的质控品稳定且精密度高，对多样品进行重复检测时，检测结果(ma值)的cv值较小。能够更加准确地提示使用者，血栓弹力图仪是否需要矫正，以及配套试剂是否合格。[0095]以上所述的仅是本发明的实施例，方案中公知的具体技术方案和/或特性等常识在此未作过多描述。应当指出，对于本领域的技术人员来说，在不脱离本发明技术方案的前提下，还可以作出若干变形和改进，这些也应该视为本发明的保护范围，这些都不会影响本发明实施的效果和专利的实用性。本技术要求的保护范围应当以其权利要求的内容为准，说明书中的具体实施方式等记载可以用于解释权利要求的内容。









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