高钙鲜牛奶及其制备方法和应用与流程 专利技术说明

食品,饮料机械,设备的制造及其制品加工制作,储藏技术1.本发明涉及乳制品制备技术领域，尤其是涉及一种高钙鲜牛奶及其制备方法和应用。背景技术：2.骨质疏松症是一种使骨折风险增加的慢性骨病，目前全球有2亿多人患有骨质疏松症，由于雌激素缺乏，使得绝经后妇女患骨质疏松症的风险更高，世界老年女性和男性的总体骨质疏松症患病率分别为35.3％和12.5％。骨质疏松症的预防干预亟需解决。伴随年龄的增长，骨组织中的钙通过尿液、汗液和粪便持续流失出现的负平衡是无法逆转的，必须不断从食物中吸收钙来维持体内的钙平衡。3.维生素d3可以由食物提供也可以通过皮肤合成，但是皮肤维生素d3的合成随着年龄的增长而减少，老年人需要增加维生素d3的膳食摄入量。天然富含维生素d3的食物很少。在餐桌上常见肉类和动物内脏中，维生素d3含量很低。维生素d3的食品强化是改善人类维生素d3缺乏的最佳方法，牛乳中较高的脂肪含量，也是强化维生素d3的良好底物。微量营养素强化也被认为是最具成本效益的公共卫生干预措施。4.世界卫生组织建议每天钙摄入量为800mg，欧洲和北美每日钙摄入量相对较高，希腊、荷兰和丹麦分别位居第一、第二和第三位(1039、1033和1011mg/天)，而中国钙摄入量仅为369mg/天，远低于世卫组织建议。乳制品在美国提供了约75％的膳食钙，在荷兰提供了约58％，但在中国仅提供6.7％。我国膳食钙来源以蔬菜(30.2％)、豆类(16.7％)和谷类(14.6％)为主。尽管蔬菜等植物性食品仍含有大量的钙，但是其钙和其他矿物质的吸收会受到草酸盐和植酸盐等抗营养因素的不利影响。牛乳不含钙吸收抑制物质，作为钙源有着比植物基替代品更高生物利用率的钙成分，还能为饮食提供额外营养物质。与药物治疗骨质疏松症相比，牛奶作为营养干预更为安全和健康。5.牛乳本身就是钙和维生素d3的天然来源，具有多种营养功能成分，已有大量研究证明其能够对骨骼健康的积极影响，由于钙和维生素d3对骨质疏松的重要作用，为满足人们对钙和维生素d3的需要，需要一种新型高钙牛奶，作为联合补充剂的载体。6.现有的高钙牛奶，存在以下问题：7.1.配方中含钙量并不高，也没有促进钙吸收的物质，钙没有被人体充分吸收。8.2.产品以奶粉和常温奶为主，这种加工和储存方式会造成原料奶中较多的营养损失。9.有鉴于此，特提出本发明。技术实现要素：10.本发明的目的之一在于提供一种高钙鲜牛奶，以缓解现有技术中配方中含钙量并不高，也没有促进钙吸收的物质，钙没有被人体充分吸收技术问题。11.本发明的目的之二在于提供一种高钙鲜牛奶的制备方法，以缓解现有技术中产品以奶粉和常温奶为主，加工和储存方式会造成原料奶中较多的营养损失的技术问题。12.为解决上述技术问题，本发明特采用如下技术方案：13.本发明的第一方面提供了一种高钙鲜牛奶，按照重量份数计，包括生牛乳97.818份-99.5096份、乳矿物盐0.2份-0.8份、酪蛋白磷酸肽0.05份-0.3份、维生素d3 0.0004份-0.002份、复配稳定剂0.24份-1.08份；14.其中，所述复配稳定剂中包括按照重量份数计的羧甲基纤维素钠0.05份-0.3份、微晶纤维素0.1份-0.2份、卡拉胶0.01份-0.03份、单双甘油脂肪酸脂0.02份-0.3份、三聚磷酸钠0.01份-0.05份和黄原胶0.05份-0.2份。15.可选地，每100ml高钙鲜牛奶中的钙含量为200mg-210mg。16.本发明的第二方面提供了所述的高钙鲜牛奶的制备方法，将生牛乳预热后加入其余原料混合均匀，再经均质机均质、巴氏杀菌和冷却灌装得到所述高钙鲜牛奶。17.可选地，生牛乳预热后的温度为50℃-65℃。18.优选地，使用预热管或者板式换热器进行所述预热过程。19.可选地，所述均质的压力为10mpa-20mpa。20.可选地，所述巴氏杀菌的温度为80℃-85℃。21.优选地，所述巴氏杀菌的时间为10s-15s。22.可选地，还包括在生牛乳预热前的过滤净化过程。23.本发明的第三方面提供了高钙鲜牛奶在防治绝经后骨质疏松症中的应用。24.可选地，所述高钙鲜牛奶的每日饮用量为350ml-450ml。25.与现有技术相比，本发明至少具有如下有益效果：26.本发明提供的高钙鲜牛奶，每100ml高钙鲜牛奶中含有蛋白质不低于3.1g，脂肪不低于3.7g，碳水化合物不低于4.7g，维生素d3不低于1.3μg，钙不低于200mg和酪蛋白磷酸肽30mg。钙含量显著高于现有产品水平，口感优异，不使用外加的稳定体系，生产成本可控，食用人群不受限制。27.本发明提供的制备方法，工艺简单，处理量大，适合大规模工业化生产。28.本发明提供的高钙鲜牛奶在防治绝经后骨质疏松症中的应用，在动物实验中显著提高去卵巢(ovx)大鼠的骨矿含量和骨密度，并且能够通过延缓雌激素流失，显著抑制破骨细胞活性，提高骨矿化速率和合成骨胶原的能力，促进成骨细胞分泌opg，在opg/rankl/rank系统中提高opg/rankl比值，促进骨形成。此外还能显著提高ovx大鼠肠道微生态的丰富度和多样性，更接近健康大鼠。附图说明29.为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。30.图1为试验例1提供的志愿者引用牛奶前后的腰椎和左右股骨骨密度(bone mineral density，bmd)变化数据图，con为对照组(n＝50)，int为试验组(n＝52)，0d为饮用前，90d为饮用90天后；31.图2为试验例2提供的去卵巢大鼠股骨骨微架构；32.图3为试验例2提供的灌喂前后sd大鼠的骨骼骨矿含量变化图：(a)大鼠腰椎l5骨矿含量变化；(b)大鼠腰椎l6骨矿含量变化；(c)大鼠右股骨骨矿含量变化；33.图4为试验例2提供的灌喂前后sd大鼠的骨骼骨密度变化图：(a)大鼠腰椎l5骨密度变化；(b)大鼠腰椎l6骨密度变化；(c)大鼠右股骨骨密度变化；34.图5为试验例2提供的灌喂前后sd大鼠的股骨机械强度变化图：(a)承压强度变化；(b)骨骼刚度变化；35.图6为试验例2提供的灌喂前后sd大鼠的骨标志物变化图：(a)灌喂前后雌激素e2变化；(b)灌喂前后alp变化；(c)灌喂前后oc变化；(d)灌喂前后p1np变化；(e)灌喂前后opg变化；(f)灌喂前后rankl变化；(g)灌喂前后tracp-5b变化；(h)灌喂前后ctx变化；36.图7为试验例2提供的灌喂前后ovx大鼠的α多样性和beta多样性变化：(a)observed otus变化；(b)chaol变化；(c)simpson变化；(d)shannon变化；(e)未加权pcoa；(f)加权pcoa。具体实施方式37.为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。本发明实施例的组件可以以各种不同的配置来布置和设计。38.根据本发明的第一方面提供的一种高钙鲜牛奶，按照重量份数计，包括生牛乳97.818份-99.5096份、乳矿物盐0.2份-0.8份、酪蛋白磷酸肽0.05份-0.3份、维生素d3 0.0004份-0.002份、复配稳定剂0.24份-1.08份；39.其中，所述复配稳定剂中包括按照重量份数计的羧甲基纤维素钠0.05份-0.3份、微晶纤维素0.1份-0.2份、卡拉胶0.01份-0.03份、单双甘油脂肪酸脂0.02份-0.3份、三聚磷酸钠0.01份-0.05份和黄原胶0.05份-0.2份。40.本发明提供的高钙鲜牛奶，每100ml高钙鲜牛奶中含有蛋白质不低于3.1g，脂肪不低于3.7g，碳水化合物不低于4.7g，维生素d3不低于1.3μg，钙不低于200mg和酪蛋白磷酸肽30mg。钙含量显著高于现有产品水平，口感优异，生产成本可控，食用人群不受限制。41.乳矿物盐是一种新资源食品，是指以乳清为原料，经去除蛋白质、乳糖等成分牛奶碱性蛋白而制成的利于人体吸收的营养补充剂。对肠胃刺激小，可被人体有效吸收与利用。乳矿物盐与人体骨骼、牙齿的组成接近，其组成中合理的钙磷比使补钙效果更好，补钙效果不会发生逆转，增加的骨密度即使在停止补充乳矿物盐三年后依然保持，而无机钙停止补充后已增加的骨密度会逐渐消失。42.酪蛋白磷酸肽(cpp)是以牛乳酪蛋白为原料，通过生物技术制得的具有生物活性的多肽，能有效促进人体对钙、铁、锌等二价矿物营养素的吸收和利用。43.维生素d3，一种作用于钙、磷代谢的激素前体，提高机体对钙、磷的吸收，使血浆钙和血浆磷的水平达到饱和程度。44.在本发明的一些实施方式中，所述高钙鲜牛奶中，生牛乳的重量份数典型但不限于97.818份、98.0份、99.0份或99.5096份；乳矿物盐的重量份数典型但不限于0.2份、0.3份、0.4份、0.5份、0.6份、0.7份或0.8份；酪蛋白磷酸肽的重量份数典型但不限于0.05份、0.1份、0.15份、0.2份、0.25份或0.3份；维生素d3的重量份数典型但不限于0.0004份或0.002份。45.可选地，每100ml高钙鲜牛奶中的钙含量为200mg-210mg。46.本发明的第二方面提供了所述的高钙鲜牛奶的制备方法，将生牛乳预热后加入其余原料混合均匀，再经均质机均质、巴氏杀菌和冷却灌装得到所述高钙鲜牛奶。47.本发明提供的制备方法，工艺简单，处理量大，适合大规模工业化生产。48.可选地，生牛乳预热后的温度为50℃-65℃。49.将生牛乳预热至60℃-65℃时，生牛乳中的脂肪球更柔软，更易均质，使各组分混合均匀，产品组织状态良好，且具有很好的冲调性。50.在本发明的一些实施方式中，生牛乳预热后的温度典型但不限于50℃、53℃、56℃、59℃、62℃或65℃。51.优选地，使用预热管或者板式换热器进行所述预热过程。52.可选地，所述均质的压力为10mpa-20mpa。53.均质是使高钙鲜牛奶体系中的分散物微粒化、均匀化的处理过程，这种处理同时起降低分散物尺度和提高分散物分布均匀性的作用。在本发明的一些实施方式中，均质的压力典型但不限于10mpa、12mpa、14mpa、16mpa、18mpa或20mpa。54.可选地，所述巴氏杀菌的温度为80℃-85℃。55.优选地，所述巴氏杀菌的时间为10s-15s。56.巴氏灭菌法既可杀死对健康有害的病原菌又可使乳质尽量少发生变化。本发明使用的巴氏杀菌方法杀菌时间更短，工作效率更高。57.可选地，还包括在生牛乳预热前的过滤净化过程。58.本发明的第三方面提供了高钙鲜牛奶在防治绝经后骨质疏松症中的应用。59.本发明提供的高钙鲜牛奶在防治绝经后骨质疏松症中的应用，在动物实验中显著提高去卵巢(ovx)大鼠的骨矿含量和骨密度，并且能够通过延缓雌激素流失，显著抑制破骨细胞活性，提高骨矿化速率和合成骨胶原的能力，促进成骨细胞分泌opg，在opg/rankl/rank系统中提高opg/rankl比值，促进骨形成。此外还能显著提高ovx大鼠肠道微生态的丰富度和多样性，更接近健康大鼠。60.可选地，所述高钙鲜牛奶的每日饮用量为350ml-450ml。61.下面结合实施例，对本发明的一些实施方式作详细说明。在不冲突的情况下，下述的实施例及实施例中的特征可以相互组合。实施例中所采用的原料物质名称，如无特殊说明的物质均可通过市售购买得到。62.实施例163.本实施例提供一种高钙鲜牛奶，包括生牛乳98.489kg、乳矿物盐0.6kg、酪蛋白磷酸肽0.2kg、维生素d3为0.001kg。复配稳定剂(羧甲基纤维素钠0.2kg、微晶纤维素0.15kg、卡拉胶0.02kg、单双甘油脂肪酸脂0.15kg、三聚磷酸钠0.04kg和黄原胶0.15kg)。64.具体制备过程如下：65.1、将生牛乳进行过滤净化，得到无杂质的原奶。66.2、将原奶经过预热罐预热到63℃后加入乳矿物盐、酪蛋白磷酸肽(cpp)、维生素d3搅拌均匀。67.3、将步骤2混合物料经均质机均质，均质压力为15mpa得到均质后的物料。68.4、将均质后物料进行巴氏杀菌，加热温度为83℃，并保持15s后冷却得到高钙鲜牛奶，最后灌装并低温储存。69.实施例270.本实施例提供一种高钙鲜牛奶，包括生牛乳97.818kg、乳矿物盐0.8kg、酪蛋白磷酸肽0.3kg、维生素d3为0.002kg、复配稳定剂(羧甲基纤维素钠0.3kg、微晶纤维素0.2kg、卡拉胶0.03kg、单双甘油脂肪酸脂0.3kg、三聚磷酸钠0.05kg和黄原胶0.2kg)。71.实施例372.本实施例提供一种高钙鲜牛奶，包括生牛乳99.5096kg、乳矿物盐0.2kg、酪蛋白磷酸肽0.05kg、维生素d3为0.0004kg。复配稳定剂(羧甲基纤维素钠0.05kg、微晶纤维素0.1kg、卡拉胶0.01kg、单双甘油脂肪酸脂0.02kg、三聚磷酸钠0.01kg和黄原胶0.05kg)。73.实施例474.本实施例提供一种高钙鲜牛奶，包括生牛乳99kg、乳矿物盐0.2kg、酪蛋白磷酸肽0.2kg、维生素d3为0.001kg。复配稳定剂(羧甲基纤维素钠0.17kg、微晶纤维素0.15kg、卡拉胶0.02kg、单双甘油脂肪酸脂0.16kg、三聚磷酸钠0.03kg和黄原胶0.13kg)。75.对比例176.本对比例提供一种市售鲜牛奶，为生牛乳经超高温灭菌后得到，其中钙含量为110mg/100ml。77.试验例178.将实施例1和对比例1得到的牛奶进行临床验证，具体验证方法如下：79.1.临床实验招募符合入排标准的患者108例，随机分为试验组和对照组。试验组每日饮用2瓶(每瓶200ml)实施例1提供的高钙鲜牛奶，对照组每日饮用2瓶(每瓶200ml)对比例1提供的普通鲜奶牛奶。分析富含钙乳品干预改善骨质、预防骨质疏松等疾病的功效。本研究获得首都医科大附属北京地坛医院医学伦理委员会批准(京地伦科字【2022】第(031)-02号)，所有志愿者签署知情同意书。80.a.入选标准81.1)年龄在40-75岁间绝经至少1年的女性；82.2)t评分(双能x射线骨密度仪检测：t值小于-1(骨量低)；83.3)对高钙乳或其他乳制品不存在厌食、不耐受或过敏症状；84.4)在北京稳定生活且近两年无搬出京计划，饮食习惯稳定，能配合完成研究者；85.b.排除标准86.(1)患有精神类疾病不能正确回答问题或不愿进行问卷调查；生活不能自理、不能清楚地回忆、回答问题者，或有明显的运动障碍；87.(2)患有任何类型的骨退行性慢性病(如糖尿病、肾结石、心脏病缓解、癌症、甲状腺机能亢进和减退、甲状旁腺机能亢进、肾和肝功能受损)、创伤性骨折史，骨软化症、肾性骨营养不良症等代谢性骨病或骨肿瘤等；中、重度肾功能损伤(血肌酐＞2mg/dl或177mmol/l)，或肝功能异常(alt》2倍正常值上限)的患者；中、重度慢性阻塞性肺部疾病；重度高血压患者、脑血管意外患者；88.(3)消化系统外科手术史，如胃切除术、胃底折叠术、结肠造瘘等，或持续性呕吐或怀疑有消化道梗阻者；89.(4)药物治疗史，过去48周中，接受过预防绝经后疾病的激素相关疗法，或摄入抗骨质疏松药物及对骨代谢有作用的药物，如苯妥英钠、卡马西平等；或过去3个月，因下列疾病接受药物治疗的：胆囊炎、消化道溃疡、尿路感染、急性肾盂肾炎、膀胱炎、甲亢等甲状腺功能异常；90.(5)急性或慢性炎性疾病，或正在接受抗生素、益生菌、益生菌或任何其他可能在纳入前3个月影响肠道微生物群的药物治疗的患者；91.(6)患有肺结核和艾滋病等传染病，患有严重器质性疾病，如癌症、冠心病、心肌梗塞以及中风等。92.(7)在治疗期间摄入其他已知影响骨代谢的膳食补充剂，包括其他牛奶、其他豆浆、维生素d3、维生素k、复合维生素和钙片等，有此情况则退组。93.饮用牛奶3个月后，再次通过双能x射线骨密度仪检测2组志愿者的骨骼情况，比较2组志愿者饮用2种牛奶前后的腰椎和左右股骨骨密度(bone mineral density，bmd)变化，如图1所示。94.可以从图1中看出饮用高钙鲜奶可以明显提高腰椎骨密度，改善骨质情况。95.试验例296.本试验例进行动物实验，以去卵巢大鼠模型模拟绝经后骨质疏松症。从斯贝福(北京)生物技术有限公司预订56只10周龄雌性未孕spf级sprague.dawley(sd)大鼠。生产许可证号：scxk(京)2019-0010，动物质量合格证编号：110324220100282383。本实验所有动物均经实验动物使用与管理委员会(iacuc)的批准(福利伦理编号：20210118yze-3r)，并遵循《北京实验动物管理委员会实验动物使用条例》的要求进行。97.因为大鼠和人体存在差异，以人每天摄取800mg钙为准，以大鼠-人体重系数6.25进行换算；0.2kg大鼠需要乳钙公式计算为(800/60)mg/kg*6.25*0.2kg后约等于16mg，即大鼠每天需16mg钙，因此大鼠需要灌胃4ml/d高钙鲜牛奶。出于动物福利考虑，为避免灌胃量过大，将高钙鲜牛奶浓缩5倍后灌胃，即200g大鼠每日灌胃1.6ml实施例1提供的高钙鲜牛奶，对比例1的牛奶也灌喂1.6ml。98.在12周龄时，对大鼠进行双侧卵巢切除术(38只)和假手术(18只)。2个月后,假手术组(sham)和卵巢去势组(ovx)组随机各取8只大鼠采集血液，骨骼和粪便样本。然后将剩余ovx大鼠随机分为3组(n＝10)：fm(实施例1)组、cm(对比例1)组和ovx对照组，灌胃90天后观察骨骼相关指标变化。99.观察对去卵巢大鼠股骨微架构的影响，结果如图2所示。100.从图2可以看出，与假手术组相比，切除卵巢后2个月的ovx组大鼠表现出严重的骨小梁丢失，皮质骨厚度明显减薄，灌胃90天后，ovx组大鼠仍有严重的骨小梁丢失，fm(实施例1)和cm(对比例1)组与假手术组相比(图2中的b)，cm(对比例1)对大范围的骨丢失有轻微的保护作用，但ovx大鼠的松质骨中仍然出现了较大的空间和较不致密的结构。fm(实施例1)组大鼠的骨小梁形态健康致密与假手术组的健康大鼠相当，说明fm(实施例1)和cm组都能延缓ovx大鼠的骨小梁丢失，fm(实施例1)组比cm(对比例1)组具有更好的保护作用。101.观察对去卵巢大鼠骨矿含量、骨密度和骨骼强度的影响，结果如图3、图4和图5所示。102.图3为灌喂前后sd大鼠的骨骼骨矿含量变化图：图3中的a为大鼠腰椎l5骨矿含量变化；图3中的b为大鼠腰椎l6骨矿含量变化；图3中的c为大鼠右股骨骨矿含量变化。103.图4为试验例2提供的灌喂前后sd大鼠的骨骼骨密度变化图：图4中的a为大鼠腰椎l5骨密度变化；图4中的b为大鼠腰椎l6骨密度变化；图4中的c为大鼠右股骨骨密度变化。104.从图3和图4可以看出，切除卵巢后2个月，与sham组相比，ovx组2节腰椎的骨矿含量并没有显著变化，但股骨骨矿含量显著降低(p＜0.05)，并且ovx组2节腰椎和股骨的骨密度下降趋势明显，其中腰椎l6和股骨骨密度显著降低(p＜0.05)。灌胃90天后，与ovx相比，补充cm(对照牛奶)和fm(实施例1)均能提高腰椎和股骨的骨矿含量，特别是fm(实施例1)组腰椎l5、l6和股骨骨矿含量均显著提高(p＜0.05)，并且略高于sham组，但不显著。与ovx相比，补充fm(实施例1)和cm(对比例1)组均能提高腰椎和股骨的骨密度，但只有fm(实施例1)能显著提高ovx大鼠腰椎l5(p＜0.05)、l6(p＜0.05)和股骨骨密度(p＜0.01)。105.图5为试验例2提供的灌喂前后sd大鼠的股骨机械强度变化图：图5中的a为承压强度变化；图5中的b为骨骼刚度变化。106.从图5可以看出，切除卵巢后2个月，ovx组承压强度和刚度较sham组略低，但没有显著差异。灌胃90天后，ovx组大鼠的承压强度为11.97±1.24kg，刚度为430.6±113.25n/cm。灌胃cm(对比例1)后，承压强度为12.46±1.74kg刚度为355.25±53.72。fm(实施例1)组则为13.93±2.01kg，437.14±74.29高于sham组10.99±1.07kg，343.67±34.17.与ovx组相比，cm(对比例1)组承压强度略有增加，fm(实施例1)组承压强度显著增加(p＜0.05).这可能对应于对大鼠股骨生物力学性能的增强。表明补充fm(实施例1)后有积极的效果。但是值得注意的是sham组的承压强度和刚度均比其余3组低。107.观察对去卵巢大鼠骨转换标志物的影响，结果如图6所示。108.图6为试验例2提供的灌喂前后sd大鼠的骨标志物变化图：图6中的a为灌喂前后雌激素e2变化；图6中的b为灌喂前后alp变化；图6中的c为灌喂前后oc变化；图6中的d为灌喂前后p1np变化；图6中的e为灌喂前后opg变化；图6中的f为灌喂前后rankl变化；图6中的g为灌喂前后tracp-5b变化；图6中的h为灌喂前后ctx变化。109.从图6中的a可以看出，雌激素(e2)可以促进降钙素的分泌，而抑制骨吸收，还可以促进肠钙的吸收，雌激素是主要的骨吸收抑制激素，可直接抑制破骨细胞的功能和活性,卵巢切除后，大鼠体内雌激素快速流失，显著下降，灌胃90天后，与ovx组相比，fm(实施例1)和cm(对比例1)组体内雌激素(e2)有升高的趋势，虽然不显著,但fm(实施例1)和cm(对比例1)能延缓雌激素(e2)的流失。110.从图6中的b可以看出，碱性磷酸酶(alp)与成骨细胞活性线性相关。它能水解无机磷酸盐，为羟基磷灰石的沉积提供磷酸，利于骨的矿化。切除卵巢后，体内骨平衡破坏，alp升高，成骨细胞活性升高，加速骨形成过程(自救过程)。90d时，fm(实施例1)和cm(对比例1)组alp下降，fm(实施例1)组显著下降并接近正常大鼠水平。说明补充2种牛奶可以改善骨平衡状态，特别是实施例1的高钙鲜牛奶。111.从图6中的c可以看出，骨钙素(oc)定位羟基磷灰石，维持骨的正常矿化速率。切除卵巢后骨矿化速率下降，只有补充fm(实施例1)牛奶才能提高骨矿化速率。112.从图6中的d可以看出，1型胶原氨基端前肽(pinp)反映成骨细胞合成骨胶原的能力。切除卵巢后，pinp降低，说明大鼠合成骨胶原的能力降低，补充fm(实施例1)和cm(对比例1)后pinp升高，说明补充2种牛奶可以提高成骨细胞合成骨胶原的能力，特别是高钙鲜牛奶。113.从图6中的e和f可以看出，opg/rankl/rank系统是破骨细胞分化过程中的重要信号传导通路，切除卵巢后，ovx大鼠opg水平显著降低，rankl升高，增加rankl与rank结合能力，促进破骨细胞增殖。灌胃90天后，fm(实施例1)组opg水平显著提高。说明补充高钙鲜牛奶可以显著促进成骨细胞分泌opg，从而提高opg/rankl比值，促进骨形成。114.从图6中的g可以看出，抗酒石酸酸性磷酸酶(tracp-5b)源于破骨细胞，与骨密度呈显著负相关。补充fm(实施例1)和cm(对比例1)可以抑制tracp-5b产生(其中实施例1的牛奶显著抑制)，并促进骨形成。115.从图6中的h可以看出，i型胶原羧基端前肽交联(ctx)反应破骨细胞活性，切除卵巢后，破骨细胞活性减弱(自身)，cm(对比例1)不能影响ctx水平，fm(实施例1)可以使ctx水平显著降低，间接显著抑制破骨细胞活性。116.观察对去卵巢大鼠肠道微生态的影响，结果如图7所示。117.在灌胃开始、灌胃45天和90天时取各组大鼠的新鲜粪便3-5粒，进行16s分析。118.从图7中的a-d可以看出，去卵巢后大鼠的observed species指数和chao指数所显示的肠道微生物区系的物种丰富度显著降低，以及衡量的物种多样性的shannon指数和simpson指数下降。灌胃90天后，实施例1提供的高钙鲜牛奶可提高ovx大鼠的observed species指数和chao指数，能够改变ovx大鼠的微生物区系多样性(显著提高香浓和辛普森指数)，更接近健康大鼠。119.从图7中的e和f可以看出，通过主坐标分析(pcoa)表明，在灌胃45天时，fm、cm组与ovx组的分离并不明显，但在灌胃90天时与初始和灌胃45天相比有明显的分离。加权与未加权的unifrac分析表明，pcoa可以将fm(实施例1)和cm(对比例1)与其他组区分开来。在前45天中，各组曲线重叠多，没有有效区分。90天后，ovx90d与ovx0d的大程度的分离说明慢性雌激素缺乏(卵巢切除后5个月)会导致微生物群落的显著变化，并且fm(实施例1)比cm(对比例1)的分离趋势更明显，似乎更能引起微生物群落的实质性变化，更接近正常大鼠的微生物群落。120.最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。









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