基于聚集诱导发光基团的表面分子印迹荧光传感器及制备方法和在罗丹明6G检测中的应用 专利技术说明

有机化合物处理,合成应用技术基于聚集诱导发光基团的表面分子印迹荧光传感器及制备方法和在罗丹明6g检测中的应用技术领域1.本发明涉及罗丹明6g(rh6g)检测技术领域，具体涉及一种基于聚集诱导发光基团的表面分子印迹荧光传感器及制备方法和在rh6g检测中的应用。背景技术：2.rh6g又名黄光碱性蕊香红，是一种蒽醌类染料，因荧光信号强、着色能力好、价格低廉等优点曾一度被应用于食品和织物的染色。但研究发现它对人体具有较强的致癌能力、生殖毒性和发育毒性，很快被很多国家和地区列为禁止使用的食品添加剂，现只被应用于生命科学、分析化学等领域。然而仍会有不法分子在巨大利益的诱惑下将其使用于食品加工领域，故建立一种能够对rh6g实现高效、灵敏、快速检测的方法迫在眉睫。3.迄今为止，rh6g的检测方法主要包括高效液相色谱法、可见分光光度法、拉曼散射法等。但由于实际样品中复杂的基质和rh6g本身可能较低的添加量，采用这些方法检测前往往需要复杂的样品前处理过程(如分离、富集等)，影响了检测的效率和准确性。因此，发展样品前处理和检测过程一体化的分析检测方法具有重要的意义。4.分子印迹技术是在仿生科学和模拟自然界中酶与底物及受体与抗体作用的基础之上发展来的一项技术。采用分子印迹技术合成的分子印迹聚合物，可对特定目标分子实现特异性识别和选择性吸附，常用于复杂样品痕量物质的分离富集等前处理过程中。但是使用分子印迹聚合物对样品中的目标分析物进行定量检测前，往往需要将目标分析物从聚合物中洗脱下来，这不仅操作复杂，更无法解决模板渗漏等造成的假阳性反应，降低可信度。荧光传感技术灵敏度高，若将其与分子印迹聚合物相结合制得分子印迹荧光传感器，可利用分子印迹聚合物对目标分析物进行选择性识别后，直接通过荧光传感单元将识别结果在线输出，使识别检测一体化，有利于避免复杂的分离、富集或洗脱等前处理过程。5.常规方法制得的分子印迹聚合物往往存在包埋过深或过紧、传质速度慢、再生效果差等问题，使得其对目标分析物的识别效果不理想；另一方面，目前常用于分子印迹荧光传感器中的荧光基团有量子点、有机荧光染料等。然而，量子点存在重金属，在制备和使用中易发生重金属泄露等问题，传统有机荧光染料在聚集态或固态下常会受到聚集诱导淬灭效应的影响，发生荧光减弱甚至完全淬灭的现象，严重影响其发光效率和在分子印迹荧光传感器中的应用。技术实现要素：6.本发明的目的是为解决现有技术中存在的问题，提供一种基于聚集诱导发光基团的表面分子印迹荧光传感器及制备方法和在rh6g检测中的应用。7.本发明为解决上述技术问题的不足，所采用的技术方案是：一种基于聚集诱导发光基团的表面分子印迹荧光传感器，该传感器以经过乙烯基修饰的四苯基吡嗪衍生物(tpp-m)为荧光基团，以sio2为载体材料的表面分子印迹聚合物为rh6g的识别基团，传感器呈现强烈的荧光，对rh6g进行吸附后，传感器在418nm处的荧光被逐渐淬灭，而在565nm处出现新的荧光峰并逐渐增加，且呈现出比率变化。8.一种制备上述荧光传感器的方法，包括以下步骤：9.1)制备tpp-m，备用；10.2)制备经双键修饰的载体材料sio2，备用；11.3)将经双键修饰的载体材料sio2加入乙腈中并超声分散，再加入甲基丙烯酸和华法林钠继续超声分散，分散结束后在搅拌下加入乙二醇二甲基丙烯酸甲酯、tpp-m溶液和偶氮二异丁腈，常温下搅拌，随后在氮气保护下升温至70-80℃反应4-8h，反应结束后，先经过离心洗涤干燥，再用索氏提取器洗脱除去模板分子，最后置于烘箱中55-65℃干燥，即制得荧光传感器。12.作为本发明一种基于聚集诱导发光基团的表面分子印迹荧光传感器的制备方法的进一步优化：步骤3)中经双键修饰的载体材料sio2、乙腈、甲基丙烯酸、华法林钠、乙二醇二甲基丙烯酸甲酯、tpp-m溶液和偶氮二异丁腈的加入量之比为：0.25-0.35g:100-200ml:0.15-0.3ml:0.1-0.2g:3.5-4ml:0.6-1.2ml:0.1-0.2g，tpp-m溶液的浓度为1×10-3mol/l。13.作为本发明一种基于聚集诱导发光基团的表面分子印迹荧光传感器的制备方法的进一步优化：步骤3)中索氏提取器洗脱除去模板分子具体为：用体积比为4:1的甲醇和乙酸混合液在索氏提取器中洗脱至使用紫外检测至无模板分子检出。14.作为本发明一种基于聚集诱导发光基团的表面分子印迹荧光传感器的制备方法的进一步优化：制备tpp-m的具体方法为：将4,4’‑二溴联苯酰和1,2-二苯基-1,2-乙二胺加入乙酸中，升温至100-120℃冷凝回流，反应结束后室温冷却至产物析出，使用硅胶柱层析法纯化得到中间产物，将中间产物、4-苯乙烯硼酸、溴化四丁铵加入k2co3溶液中，再加入四氢呋喃搅拌至溶解，在氮气保护下加入四三苯基磷钯催化剂，在80-90℃下冷凝回流24-48h，然后将反应液旋干，最后经硅胶柱层析法纯化，即制得tpp-m。15.作为本发明一种基于聚集诱导发光基团的表面分子印迹荧光传感器的制备方法的进一步优化：4,4’‑二溴联苯酰、1,2-二苯基-1,2-乙二胺和乙酸的加入量之比为：2-6mmol:4-8mmol:4-8ml；中间产物、4-苯乙烯硼酸、溴化四丁铵、k2co3溶液、四氢呋喃和四三苯基磷钯催化剂的加入量之比为：1-3mmol:4-8mmol:0.01-0.03g:1-3ml:15-25ml:0.1-0.2g，k2co3溶液的浓度为1.5-2.5mmol/l。16.作为本发明一种基于聚集诱导发光基团的表面分子印迹荧光传感器的制备方法的进一步优化：制备经双键修饰的载体材料sio2的具体方法为：将乙醇、氨水和蒸馏水磁力搅拌至完全混合，在磁力搅拌下将正硅酸乙酯和乙醇混合液快速加入上述溶液中，在室温下搅拌6h，之后将其离心、洗涤并烘干，制得sio2，将sio2超声分散至甲苯中形成均匀的溶液，然后在磁力搅拌下将γ-甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷滴加入溶液中，在60℃的氮气保护下反应12h，最后将产物离心，然后依次用甲苯和乙醇洗涤，在60℃下真空干燥12h得到经双键修饰的载体材料sio2。17.作为本发明一种基于聚集诱导发光基团的表面分子印迹荧光传感器的制备方法的进一步优化：乙醇、氨水、蒸馏水、正硅酸乙酯和乙醇混合液的加入量之比为：40-70ml:6-10ml:9-13ml:4-6ml:10-30ml；sio2、甲苯和γ-甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷的加入量之比为：0.25-0.75g:45-55ml:3-5ml。18.一种利用上述荧光传感器检测rh6g的方法：在荧光测量前，将传感器加入待测溶液中，并在恒温摇床上震荡30min，然后将其离心、过滤，并用过量蒸馏水洗涤，干燥后将样品装入荧光固体样品槽进行测量。19.测量条件为激发波长360nm，激发和发射狭缝宽度均为1nm。20.本发明具有以下有益效果：本发明的荧光传感器以tpp-m为荧光基团，以sio2为载体材料的表面分子印迹聚合物为识别基团。传感器自身由于tpp-m的引入而显示出强烈的荧光。当对rh6g进行吸附后，传感器自身在418nm处的荧光被逐渐淬灭，而在565nm处出现新的荧光峰并逐渐增加，表现出比率变化。该传感器在0.0-10.0μmol/l的浓度范围内的荧光强度之比(i565/i418)与rh6g的浓度具有良好的线性关系，且具有较低的检出限和较高的灵敏度。附图说明21.图1为tpp-m在不同fw值的h2o/thf溶液中的荧光光谱图；22.图2为tpp-m在不同fw值的h2o/thf溶液中的荧光照片；23.图3为tpp-smips在吸附不同浓度的rh6g后的荧光光谱图；24.图4为tpp-smips在吸附不同浓度的rh6g后的荧光强度比值i565/i418；25.图5为tpp-smips的14天荧光稳定性图；26.图6为tpp-smips对rh6g的响应时间图；27.图7为tpp-smips的选择性对比图；28.图8为tpp-smips的重复使用性能图；29.图9为tpp-smips对rh6g的工作曲线图。具体实施方式30.为了更好地理解本发明，下面结合实施例进一步阐明本发明的内容，但本发明的内容并不局限于下面的实施例。31.一种基于聚集诱导发光基团的表面分子印迹荧光传感器，该传感器以tpp-m为荧光基团，以sio2为载体材料的表面分子印迹聚合物为rh6g的识别基团，传感器呈现强烈的荧光，对rh6g进行吸附后，传感器在418nm处的荧光被逐渐淬灭，而在565nm处出现新的荧光峰并逐渐增加，且呈现出比率变化。32.一种制备上述荧光传感器的方法，包括以下步骤：33.1)制备tpp-m，备用；34.具体地，将4,4’‑二溴联苯酰和1,2-二苯基-1,2-乙二胺加入乙酸中，升温至100-120℃冷凝回流，反应结束后室温冷却至产物析出，使用硅胶柱层析法纯化得到中间产物，将中间产物、4-苯乙烯硼酸、溴化四丁铵加入k2co3溶液中，再加入四氢呋喃搅拌至溶解，在氮气保护下加入四三苯基磷钯催化剂，在80-90℃下冷凝回流24-48h，然后将反应液旋干，最后经硅胶柱层析法纯化，即制得tpp-m。35.4,4’‑二溴联苯酰、1,2-二苯基-1,2-乙二胺和乙酸的加入量之比为：2-6mmol:4-8mmol:4-8ml；中间产物、4-苯乙烯硼酸、溴化四丁铵、k2co3溶液、四氢呋喃和四三苯基磷钯催化剂的加入量之比为：1-3mmol:4-8mmol:0.01-0.03g:1-3ml:15-25ml:0.1-0.2g，k2co3溶液的浓度为1.5-2.5mmol/l。36.2)制备经双键修饰的载体材料sio2，备用；37.具体地，将乙醇、氨水和蒸馏水磁力搅拌至完全混合，在磁力搅拌下将正硅酸乙酯和乙醇混合液快速加入上述溶液中，在室温下搅拌6h，之后将其离心、洗涤并烘干，制得sio2，将sio2超声分散至甲苯中形成均匀的溶液，然后在磁力搅拌下将γ-甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷滴加入溶液中，在60℃的氮气保护下反应12h，最后将产物离心，然后依次用甲苯和乙醇洗涤，在60℃下真空干燥12h得到经双键修饰的载体材料sio2。38.乙醇、氨水、蒸馏水、正硅酸乙酯和乙醇混合液的加入量之比为：40-70ml:6-10ml:9-13ml:4-6ml:10-30ml；sio2、甲苯和γ-甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷的加入量之比为：0.25-0.75g:45-55ml:3-5ml。39.3)将经双键修饰的载体材料sio2加入乙腈中并超声分散，再加入甲基丙烯酸和华法林钠继续超声分散，分散结束后在搅拌下加入乙二醇二甲基丙烯酸甲酯、tpp-m溶液和偶氮二异丁腈，常温下搅拌，随后在氮气保护下升温至70-80℃反应4-8h，反应结束后，先经过离心洗涤干燥，再用索氏提取器洗脱除去模板分子，最后置于烘箱中55-65℃干燥，即制得荧光传感器。40.经双键修饰的载体材料sio2、乙腈、甲基丙烯酸、华法林钠、乙二醇二甲基丙烯酸甲酯、tpp-m溶液和偶氮二异丁腈的加入量之比为：0.25-0.35g:100-200ml:0.15-0.3ml:0.1-0.2g:3.5-4ml:0.6-1.2ml:0.1-0.2g，tpp-m溶液以四氢呋喃为溶剂，溶液的浓度为1×10-3mol/l。41.索氏提取器洗脱除去模板分子具体为：用体积比为4:1的甲醇和乙酸混合液在索氏提取器中洗脱至使用紫外检测至无模板分子检出。42.一种利用上述荧光传感器检测rh6g的方法：在荧光测量前，将传感器加入待测溶液中，并在恒温摇床上震荡30min，然后将其离心、过滤，并用过量蒸馏水洗涤，干燥后将样品装入荧光固体样品槽进行测量。测量条件为激发波长360nm，激发和发射狭缝宽度均为1nm。43.实施例144.一种制备基于聚集诱导发光基团的表面分子印迹荧光传感器的方法，包括以下步骤：45.1)制备tpp-m，备用；46.称量4,4’‑二溴联苯酰(4mmol)和1,2-二苯基-1,2-乙二胺(6mmol)至于25ml烧瓶中，然后加入6ml乙酸，于通风橱中冷凝回流110℃磁力搅拌3.5-4h，室温冷却至产物析出，使用硅胶柱层析法纯化得到化合物tpp-2br。准确称量tpp-2br(2mmol)、4-苯乙烯硼酸(6mmol)、0.02g溴化四丁铵、2ml浓度为2mmol/l的k2co3至于50ml圆底烧瓶中，加入20ml四氢呋喃搅拌至溶解。在氮气保护下加入0.16g四三苯基磷钯催化剂，在85℃下冷凝回流36h。然后将反应液旋干，硅胶柱层析法纯化产品得到tpp-m。tpp-m的合成路线如下所示：47.《tpp-m的聚集诱导发光性能》48.对经过双键修饰的tpp-m的聚集诱导发光性能进行了测试。如图1所示，tpp-m在纯thf溶液中，即水的百分含量(fw)为0％时，其在443nm处的荧光强度很弱。当tpp-m在fw为99％的h2o/thf混合溶液中，其荧光强度却非常强。这种现象可以归因于tpp-m在不良溶剂中的溶解度降低，从而形成聚集体并发射出强烈的荧光。这表明tpp-m具有典型的聚集诱导发光特征。同时，如图2所示，用肉眼也可以直接看出tpp-m在紫外光照射下在fw＝99％的h2o/thf溶液中具有比在thf溶液中强得多的荧光颜色。以上结果表明，经过乙烯基修饰的tpp-m仍表现出典型的聚集诱导发光特征，这将有助于传感器表现出优异的发光性能。49.2)制备经双键修饰的载体材料sio2(sio2@mps)，备用；50.将56ml乙醇、8ml氨水和11ml蒸馏水加入250ml烧瓶中，磁力搅拌至完全混合。在磁力搅拌下将5ml正硅酸乙酯和20ml乙醇混合液快速加入上述溶液中，在室温下搅拌6h。之后将其离心(6000rpm，5min)，并依次用蒸馏水和乙醇洗涤至中性，最后将产物sio2在60℃烘干12h。随后取0.50g的sio2超声分散至50ml甲苯中30min形成均匀的溶液。然后在磁力搅拌下将4ml的mps，即γ-甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷滴加入溶液中，在60℃的氮气保护下反应12h。最后将产物离心(6000rpm，5min)，然后依次用甲苯和乙醇洗涤3次除去未反应的原料，在60℃下真空干燥12h得到经双键修饰的载体材料sio2，简称为sio2@mps。51.3)制备表面分子印迹荧光传感器(tpp-smips)；52.称取0.30g的sio2@mps和120ml乙腈倒入250ml三口烧瓶中超声分散10min。然后继续向三口烧瓶中加入0.26ml甲基丙烯酸和0.17g的华法林钠，继续超声10min。然后在搅拌下加入3.77ml乙二醇二甲基丙烯酸甲酯、1ml浓度为1×10-3mol/l的tpp-m溶液、0.15g偶氮二异丁腈，常温下继续搅拌20min。随后在氮气保护下升温至75℃反应6h。然后离心洗涤干燥后用甲醇:乙酸(4:1，v/v)在索氏提取器中洗脱至使用紫外检测至无代替模板分子检出，然后60℃下干燥，即制得表面分子印迹荧光传感器tpp-smips。53.《tpp-smips对rh6g的荧光响应》54.为了评价tpp-smips对rh6g的定量分析能力，首先记录了tpp-smips吸附不同浓度rh6g后的荧光光谱。如图3所示，当rh6g浓度上升时，tpp-smips在418nm处的荧光强度被逐渐淬灭，对应在565nm处出现一个新的荧光峰并逐渐增加。荧光强度值之比(i565/i418)与rh6g在0.0-10.0μmol/l的浓度范围内呈良好的线性关系(图4)，表现出典型的比率型响应。与单发射荧光传感器相比，具有两个荧光信号的比率型传感器可以避免外界环境的影响，通过自身信号的内校正提供更准确的数据，这有利于对rh6g的痕量分析检测。55.《荧光稳定性》56.tpp-smips的荧光稳定性通过室温下对其在连续14天的荧光光谱来评价。从图5中可以看出，418nm处的荧光强度在14天内没有明显的变化，这表明由于聚集诱导发光基团的引入，tpp-smips具有很强的光学稳定性。57.《响应时间》58.如图6所示，在将rh6g加入tpp-smips后的180s内，i565/i418快速上升，随后基本趋于稳定，说明tpp-smips可在较短时间内对rh6g吸附饱和。59.《tpp-smips的选择性》60.传感器的选择性是能否对目标分析物进行检测的一个重要因素。采用tpp-smips对罗丹明b、亮蓝、茜素红、酸性品红、苋菜红、胭脂红和诱惑红等一些结构类似物和潜在干扰物进行吸附后，研究其对rh6g的选择性。如图7所示，与其他样品相比，tpp-smips吸附rh6g后的荧光强度之比i565/i418明显高于其他物质，表明tpp-smips对rh6g具有良好的选择性。61.《tpp-smips的重复使用性》62.作为分子印迹传感器的一种，重复使用性是其性能的重要标准之一。在本研究中，使用tpp-smips进行了连续10次吸附-洗脱循环，记录每个循环的荧光强度之比i565/i418。从图8可以看出，在进行吸附-洗脱循环后，tpp-smips的荧光强度之比几乎保持不变。这些结果表明，tpp-smips具有良好的重复使用性。63.《tpp-smips的线性响应》64.由前面的图4可知，i565/i418与rh6g在浓度为0.0-10.0μmol/l的范围内有良好的线性响应。从图9可以看出，即使rh6g的浓度小至0.0-0.1μmol/l，其线性关系也非常好。基于公式3sb/m，其检出限(lod)可计算得到2.82nmol/l，其中sb为空白测量值的标准差(n＝10)，m为校准曲线斜率。以上结果表明，tpp-smips具有较高灵敏度和较低的检出限，可以用于对痕量rh6g进行检测。65.《实际样品检测》66.为了验证tpp-smips在实际样品检测中的准确性，我们提供了hplc检测结果作为对比(表1)。由表可知，辣椒粉和湖水的空白样品中均未检测到rh6g。在实际样品中添加不同浓度的rh6g(0.300、0.600和0.900μmol/l)，每次实验重复3次，得到回收率为95.4-100.2％，相对标准偏差(rsd)为2.2％-6.1％。结果表明，tpp-smips可用于实际样品的高灵敏度和选择性识别检测。表1 tpp-smips对实际样品中rh6g的测定(n＝3)67.实施例268.一种制备基于聚集诱导发光基团的表面分子印迹荧光传感器的方法，包括以下步骤：69.1)制备tpp-m，备用；70.称量4,4’‑二溴联苯酰(2mmol)和1,2-二苯基-1,2-乙二胺(4mmol)至于25ml烧瓶中，然后加入4ml乙酸，于通风橱中冷凝回流110℃磁力搅拌3.5-4h，室温冷却至产物析出，使用硅胶柱层析法纯化得到化合物tpp-2br。准确称量tpp-2br(1mmol)、4-苯乙烯硼酸(4mmol)、0.01g溴化四丁铵、1ml浓度为1.5mmol/l的k2co3至于50ml圆底烧瓶中，加入15ml四氢呋喃搅拌至溶解。在氮气保护下加入0.1g四三苯基磷钯催化剂，在80℃下冷凝回流24h。然后将反应液旋干，硅胶柱层析法纯化产品得到tpp-m。71.2)制备经双键修饰的载体材料sio2(sio2@mps)，备用；72.将40ml乙醇、6ml氨水和9ml蒸馏水加入250ml烧瓶中，磁力搅拌至完全混合。在磁力搅拌下将4ml正硅酸乙酯和15ml乙醇混合液快速加入上述溶液中，在室温下搅拌6h。之后将其离心(6000rpm，5min)，并依次用蒸馏水和乙醇洗涤至中性，最后将产物用60℃烘干12h，即可得到sio2。随后取0.25g sio2超声分散至45ml甲苯中30min形成均匀的溶液。然后在磁力搅拌下将3mlγ-甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷滴加入溶液中，在60℃的氮气保护下反应12h。最后将产物离心(6000rpm，5min)，然后依次用甲苯和乙醇洗涤3次除去未反应的原料，在60℃下真空干燥12h得到经双键修饰的载体材料sio2(sio2@mps)。73.3)制备表面分子印迹荧光传感器(tpp-smips)；74.称取0.25g sio2@mps和100ml乙腈倒入250ml三口烧瓶中超声分散10min。然后继续向三口烧瓶中加入0.15ml甲基丙烯酸和0.1g的华法林钠，继续超声10min。然后在搅拌下加入3.5ml乙二醇二甲基丙烯酸甲酯、0.6ml浓度为1×10-3mol/l的tpp-m溶液、0.1g偶氮二异丁腈，常温下继续搅拌20min。随后在氮气保护下升温至75℃反应6h。然后离心洗涤干燥后用甲醇:乙酸(4:1，v/v)在索氏提取器中洗脱至使用紫外检测至无代替模板分子检出，然后60℃下干燥，即制得表面分子印迹荧光传感器(tpp-smips)。75.实施例376.一种制备基于聚集诱导发光基团的表面分子印迹荧光传感器的方法，包括以下步骤：77.1)制备tpp-m，备用；78.称量4,4’‑二溴联苯酰(6mmol)和1,2-二苯基-1,2-乙二胺(8mmol)至于25ml烧瓶中，然后加入8ml乙酸，于通风橱中冷凝回流110℃磁力搅拌3.5-4h，室温冷却至产物析出，使用硅胶柱层析法纯化得到tpp-2br。准确称量tpp-2br(3mmol)、4-苯乙烯硼酸(8mmol)、0.03g溴化四丁铵、3ml浓度为2mmol/l的k2co3至于50ml圆底烧瓶中，加入25ml四氢呋喃搅拌至溶解。在氮气保护下加入0.2g四三苯基磷钯催化剂，在80℃下冷凝回流48h。然后将反应液旋干，硅胶柱层析法纯化产品得到tpp-m。79.2)制备经双键修饰的载体材料sio2(sio2@mps)，备用；80.将70ml乙醇、10ml氨水和13ml蒸馏水加入250ml烧瓶中，磁力搅拌至完全混合。在磁力搅拌下将6ml正硅酸乙酯和30ml乙醇混合液快速加入上述溶液中，在室温下搅拌6h。之后将其离心(6000rpm，5min)，并依次用蒸馏水和乙醇洗涤至中性，最后将产物用60℃烘干12h，即可得到sio2。随后取0.75g sio2超声分散至55ml甲苯中30min形成均匀的溶液。然后在磁力搅拌下将5mlγ-甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷滴加入溶液中，在60℃的氮气保护下反应12h。最后将产物离心(6000rpm，5min)，然后依次用甲苯和乙醇洗涤3次除去未反应的原料，在60℃下真空干燥12h得到经双键修饰的载体材料sio2(sio2@mps)。81.3)制备表面分子印迹荧光传感器(tpp-smips)；82.称取0.35g sio2@mps和200ml乙腈倒入250ml三口烧瓶中超声分散10min。然后继续向三口烧瓶中加入0.3ml甲基丙烯酸和0.2g的华法林钠，继续超声10min。然后在搅拌下加入4ml乙二醇二甲基丙烯酸甲酯、1.2ml浓度为1×10-3mol/l的tpp-m溶液、0.2g偶氮二异丁腈，常温下继续搅拌20min。随后在氮气保护下升温至75℃反应6h。然后离心洗涤干燥后用甲醇:乙酸(4:1，v/v)在索氏提取器中洗脱至使用紫外检测至无代替模板分子检出，然后60℃下干燥，即制得表面分子印迹荧光传感器(tpp-smips)。83.以上对本发明的具体实施例进行了描述。需要理解的是，本发明并不局限于上述特定实施方式，本领域技术人员可以在权利要求的范围内做出各种变形或修改，这并不影响本发明的实质内容。









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