一种环境样品中环磺酮残留量检测方法 专利技术说明

测量装置的制造及其应用技术1.本发明涉及环境检测领域，具体的说是一种环境样品中环磺酮残留量检测方法。背景技术：2.环磺酮属于三酮类选择性广谱型除草剂，主要用于防治玉米及其他作物田地的阔叶杂草和禾本科杂草，属于4-羟基苯基丙酮酸双氧化酶(hppd)抑制剂类除草剂，已在美国、英国、澳地利、巴西等国获得登记使用。我国已有2个农药制剂产品获得登记，用于玉米地杂草的防治，环磺酮的化学结构式为：3.目前，关于环磺酮的信息主要有产品介绍、原药分析、原药合成研究、制剂防效研究、植物源食品中残留分析方法研究、玉米上残留研究、土壤中降解研究，尚未见同时能够检测土壤、沉积物和水体等多种环境样品中环磺酮残留分析方法的研究，也未见关于环磺酮残留的检测方法的国家或行业标准。随着环磺酮的登记使用，残留在环境中的环磺酮对环境、生物和人类存在潜在威胁，因此有必要建立一种准确、可靠、通用的残留分析方法。4.粟有志、李芳等在《quechers-高效液相色谱-串联质谱法测定植物源食品中环磺酮残留》一文中提到了quechers(quick,easy,cheap,effective,rugged and safe)前处理方法和液相色谱-串联质谱法测定植物源食品(玉米、大米、小麦、葡萄、苹果、葡萄干、枸杞、西红柿、黄瓜和白菜)中环磺酮残留量；10种基质的添加回收率为82.0％-111.8％，相对标准偏差为3.0％-14.9％，其基质效应为-31.7％～2.5％，其中只有3种基质的基质效应少于10％。quechers前处理方法因其快速、简单等特点被广泛应用于食品领域农药残留检测，除杂常用到毫克级的石墨化碳黑粉末(gcb)、氨基粉末、乙二胺-n-丙基硅烷(psa)等粉末，但其除杂效果有限，残留在共提取溶液中的杂质较多，对仪器污染明显，基质效应也明显，因此影响准确定性和定量分析；在应用到土壤等环境固体样品时，还存在其提取效果不理想、样品容量有限等缺点。因此，针对环境样品有必要建立一种解决上述问题的环磺酮残留量检测方法。技术实现要素：5.本发明提供了一种环境样品中环磺酮残留量检测方法，该方法依次通过提取、复溶、净化和测定检测出环境样品中环磺酮残留量，该方法操作简单，回收率和重复性高，测量数据精准度高。6.为了解决上述问题，本发明采用的技术方案如下：7.一种环境样品中环磺酮残留量检测方法，包括以下步骤：8.(1)提取：称取样品并加入乙腈溶解，样品质量和乙腈体积比为1g：2-4ml，然后振荡并进行一次抽滤，滤渣继续加入乙腈溶解，然后振荡并进行二次抽滤，两次抽滤的滤液置于装有氯化钠的量筒中，振荡、静置分层后取乙腈层并干燥得到提取物；9.(2)复溶：将提取物用掺有甲酸的乙腈水溶液溶解得净化液；10.(3)净化：取固相萃取柱并预淋，取净化液上样，再用乙腈水溶液淋洗，最后用乙腈洗脱，收集洗脱液过滤膜得待测物；11.(4)测定：采用超高效液相色谱-质谱/质谱联用仪检测待测物。12.进一步地，所述步骤(1)中样品质量和乙腈体积比为1g：4ml。13.进一步地，所述步骤(1)中样品为土壤、沉积物或水样。14.进一步地，所述步骤(1)中样品为沉积物时，还需要加入氨水进行溶解，样品质量和氨水体积比为1g：0.1-0.4ml。15.进一步地，所述步骤(1)中样品为沉积物时，所述样品质量和氨水体积比为1g：0.1ml。16.进一步地，所述步骤(1)中样品为土壤时，还需要加入氨水和水进行溶解，样品质量和氨水体积比为1g：0.1-0.4ml。17.进一步地，所述步骤(1)中样品为土壤时，所述样品质量和氨水体积比为1g：0.1ml。18.进一步地，所述步骤(2)中每1ml乙腈层需要添加5ml掺有甲酸的20％乙腈水溶液进行超声溶解，其中甲酸掺有率为2％。19.进一步地，所述步骤(3)中固相萃取柱中的净化材料选用c18，淋洗使用的是30％的乙腈水溶液。20.进一步地，所述步骤(4)中液相测定条件为：色谱柱：c18反相色谱柱；流动相：a相为乙腈，b相为0.1％甲酸水溶液；梯度洗脱程序：0min，a为50％；1min，a为90％；3.5min，a为90％；4min，a为50％；5.0min，a为50％；流速：0.20ml/min柱温：40℃进样体积：2.00μl；21.质谱测定条件为：电离方式：esi+，采用mrm多反应监测；毛细管电压：2.50kv；脱溶剂温度：400℃；脱溶剂气流量：800l/hr；定量*、定性离子对：441.0》261.8*，441.0》340.9。22.本发明具有以下有益效果：23.1、本发明方法采用固相萃取净化法，通过在上样溶液(即净化液)添加甲酸并在净化时多步骤使用不同极性溶液淋洗，可以有效去除提取液中的共提杂质，避免了样品的基质干扰，获得良好的检测效果。本发明方法具有较高的准确度，精密度和灵敏度，杂质干扰小，通用性强，可以有效的测定环境样品(土壤、沉积物和水)中环磺酮残留。24.2、本发明建立了使用超高效液相色谱-质谱/质谱联用仪(uplc/ms/ms)法测定土壤、沉积物和水中环磺酮残留量的方法，方法最低检测限为0.00002mg/kg或mg/l，定量限为0.00007mg/kg或mg/l，本发明土壤中环磺酮添加平均回收率为81.7％～99.5％，rsd为1.9％～7.9％；沉积物中环磺酮添加平均回收率为75.8％～84.0％，rsd为2.5％～9.2％；水中环磺酮添加平均回收率为78.9％～93.9％，rsd为1.9％～8.7％，相对于quechers方法的添加回收率为82.0％-111.8％，相对标准偏差为3.0％-14.9％而言，本发明的添加回收率范围更窄，相对标准偏差更低，从而说明了本方法更加稳定，精确度和灵敏度都更高。25.3、本发明通过多次试验得出在环境样品检测时，提取步骤中样品质量和氨水体积、乙腈体积的比例为1g：0.1ml：4ml时，为最优提取配比；复溶步骤中使用掺有2％的甲酸的20％乙腈水溶液作为溶剂，溶出效果最好，尤其针对土壤样品，后续上样净化效果更佳；净化步骤中使用26.作为净化材料的固相萃取柱时，环磺酮保留能力最强，有利于杂质的分离，在净化时首先选用20％乙腈水溶液(掺有2％甲酸)上样、30％乙腈水溶液淋洗去除杂质，最后用强极性的乙腈完全洗脱环磺酮，保证环磺酮的回收率。附图说明27.图1为本发明提供的标准溶液的液相色谱-质谱/质谱图谱；28.图2为本发明提供的水空白的液相色谱-质谱/质谱图谱；29.图3为本发明提供的水回收的液相色谱-质谱/质谱图谱；30.图4为本发明提供的土壤空白的液相色谱-质谱/质谱图谱；31.图5为本发明提供的土壤回收的液相色谱-质谱/质谱图谱；32.图6为本发明提供的沉积物空白的液相色谱-质谱/质谱图谱；33.图7为本发明提供的沉积物回收的液相色谱-质谱/质谱图谱；34.图8为本发明提供的不同c18固相萃取柱的回收率柱形图；35.图9为本发明提供的f柱在各个比例的淋洗溶剂下的每段回收率折线图；36.图10为本发明提供的f柱在各个比例的淋洗溶剂下的累积回收率折线图。具体实施方式37.为了更为具体地描述本发明，下面结合附图及具体实施方式对本发明的技术方案进行详细说明。这些说明仅仅是表明本发明是如何实现的，并不能限定本发明的具体范围。本发明的范围在权利要求中限定。38.实施例139.本实施例提供了一种环境样品中环磺酮残留量检测方法，本实施例的环境样品为水稻土，包括以下步骤：40.(1)提取：称取20.0g土壤样品(精确至0.01g)，置于150ml三角瓶中，加入10ml水和40ml乙腈，振荡30min后抽滤，滤液转入装有8g氯化钠的100ml具塞量筒中，滤渣返回到原三角瓶中再加入40ml乙腈振荡30min后抽滤，合并滤液于具塞量筒中，剧烈振摇约1min，静置分层，然后吸取10ml乙腈层置于平底烧瓶中，在40℃条件下旋转蒸发至干，氮气吹干得提取物；41.(2)复溶：在装有提取物的平底烧瓶中依次加入5.0ml20％乙腈水溶液和0.1ml甲酸，超声溶解，得净化液；42.(3)净化：取固相萃取柱c18并依次用5ml乙腈和5ml纯净水预淋，取净化液上样，再用2.5ml30％乙腈水溶液淋洗，最后用2.5ml乙腈洗脱，收集洗脱液，过0.22μm滤膜，得待测物；43.(4)测定：采用超高效液相色谱-质谱/质谱联用仪检测。44.测定的条件为：45.色谱柱：waters acquitybeh c18(2.1×100mm，1.7μm)；46.柱温：40℃；47.流速：0.20ml/min；48.流动相：a相为乙腈，b相为0.1％甲酸水溶液，49.梯度洗脱程序：0min，a为50％；1min，a为90％；3.5min，a为90％；4min，a为50％；5.0min，a为50％；50.进样量：2μl；外标法定量；51.质谱条件：毛细管电压为2.5kv，脱溶剂温度为400℃，脱溶剂气流量为800l/hr。电离方式为esi+，检测方式为多反应监测扫描模式(mrm)，定量*、定性离子对为441.0》261.8*，441.0》340.9。52.测定结果：通过以上步骤测定沉积物中环磺酮的含量为1.71mg/kg。53.实施例254.本实施例提供了一种环境样品中环磺酮残留量检测方法，本实施例的环境样品为水稻土，包括以下步骤：55.(1)提取：称取20.0g土壤样品(精确至0.01g)，置于150ml三角瓶中，加入8.0ml水、2.0ml甲酸和40ml乙腈，振荡30min后抽滤，滤液转入装有8g氯化钠的100ml具塞量筒中，滤渣返回到原三角瓶中再加入40ml乙腈振荡30min后抽滤，合并滤液于具塞量筒中，剧烈振摇约1min，静置分层，然后吸取10ml乙腈层置于平底烧瓶中，在40℃条件下旋转蒸发至干，氮气吹干得提取物；56.(2)复溶：在装有提取物的平底烧瓶中依次加入5.0ml20％乙腈水溶液和0.1ml甲酸，超声溶解，得净化液；57.(3)净化：取固相萃取柱c18并依次用5ml乙腈和5ml纯净水预淋，取净化液上样，再用2.5ml30％乙腈水溶液淋洗，最后用2.5ml乙腈洗脱，收集洗脱液，过0.22μm滤膜，得待测物；58.(4)测定：采用超高效液相色谱-质谱/质谱联用仪检测。本实施例的测定条件与实施例1相同。59.测定结果：通过以上步骤测定沉积物中环磺酮的含量为1.62mg/kg。60.实施例361.本实施例提供了一种环境样品中环磺酮残留量检测方法，本实施例的环境样品为水稻土，包括以下步骤：62.(1)提取：称取20.0g土壤样品(精确至0.01g)，置于150ml三角瓶中，加入8ml水、2ml的hcl(1mol/l)和40ml乙腈，振荡30min后抽滤，滤液转入装有8g氯化钠的100ml具塞量筒中，滤渣返回到原三角瓶中再加入40ml乙腈振荡30min后抽滤，合并滤液于具塞量筒中，剧烈振摇约1min，静置分层，然后吸取10ml乙腈层置于平底烧瓶中，在40℃条件下旋转蒸发至干，氮气吹干得提取物；63.(2)复溶：在装有提取物的平底烧瓶中依次加入5.0ml20％乙腈水溶液和0.1ml甲酸，超声溶解，得净化液；64.(3)净化：取固相萃取柱c18并依次用5ml乙腈和5ml纯净水预淋，取净化液上样，再用2.5ml30％乙腈水溶液淋洗，最后用2.5ml乙腈洗脱，收集洗脱液，过0.22μm滤膜，得待测物；65.(4)测定：采用超高效液相色谱-质谱/质谱联用仪检测。本实施例的测定条件与实施例1相同。66.测定结果：通过以上步骤测定沉积物中环磺酮的含量为1.75mg/kg。67.实施例468.本实施例提供了一种环境样品中环磺酮残留量检测方法，本实施例的环境样品为水稻土，包括以下步骤：69.(1)提取：称取20.0g沉积物样品(精确至0.01g)，置于150ml三角瓶中，加入8.0ml水、2ml氨水和40ml乙腈，振荡30min后抽滤，滤液转入装有8g氯化钠的100ml具塞量筒中，滤渣返回到原三角瓶中再加入40ml乙腈振荡30min后抽滤，合并滤液于具塞量筒中，剧烈振摇约1min，静置分层，然后吸取10ml乙腈层置于平底烧瓶中，在40℃条件下旋转蒸发至干，氮气吹干得提取物；70.(2)复溶：在装有提取物的平底烧瓶中依次加入5.0ml20％乙腈水溶液和0.1ml甲酸，超声溶解，得净化液；71.(3)净化：取固相萃取柱c18并依次用5ml乙腈和5ml纯净水预淋，取净化液上样，再用2.5ml30％乙腈水溶液淋洗，最后用2.5ml乙腈洗脱，收集洗脱液，过0.22μm滤膜，得待测物；72.(4)测定：采用超高效液相色谱-质谱/质谱联用仪检测。本实施例的测定条件与实施例1相同。73.测定结果：通过以上步骤测定沉积物中环磺酮的含量为1.92mg/kg。74.实施例575.本实施例提供了一种环境样品中环磺酮残留量检测方法，本实施例的环境样品为水稻土，包括以下步骤：76.(1)提取：称取20.0g土壤样品(精确至0.01g)，置于150ml三角瓶中，加入8ml水、2ml 1mol/l的naoh和40ml乙腈，振荡30min后抽滤，滤液转入装有8g氯化钠的100ml具塞量筒中，滤渣返回到原三角瓶中再加入40ml乙腈振荡30min后抽滤，合并两次的滤液于具塞量筒中，剧烈振摇约1min，静置分层，然后吸取10ml乙腈层置于平底烧瓶中，在40℃条件下旋转蒸发至干，氮气吹干，得提取物；77.(2)复溶：在装有提取物的平底烧瓶中依次加入5.0ml20％乙腈水溶液和0.1ml甲酸，超声溶解，得净化液；78.(3)净化：取固相萃取柱c18并依次用5ml乙腈和5ml纯净水预淋，取净化液上样，再用2.5ml30％乙腈水溶液淋洗，最后用2.5ml乙腈洗脱，收集洗脱液，过0.22μm滤膜，得待测物；79.(4)测定：采用超高效液相色谱-质谱/质谱联用仪检测。本实施例的测定条件与实施例1相同。80.测定结果：通过以上步骤测定土壤中环磺酮的含量为1.28mg/kg。81.实施例682.本实施例提供了一种环境样品中环磺酮残留量检测方法，本实施例的环境样品为土壤样，包括以下步骤：83.(1)提取：称取20.0g土壤样品(精确至0.01g)，置于150ml三角瓶中，加入6ml水、4.0ml氨水和40ml乙腈，振荡30min后抽滤，滤液转入装有8g氯化钠的100ml具塞量筒中，滤渣返回到原三角瓶中再加入40ml乙腈振荡30min后抽滤，合并两次的滤液于具塞量筒中，剧烈振摇约1min，静置分层，然后吸取10ml乙腈层置于平底烧瓶中，在40℃条件下旋转蒸发至干，氮气吹干，得提取物；84.(2)复溶：在装有提取物的平底烧瓶中依次加入5.0ml20％乙腈水溶液和0.1ml醋酸，超声溶解，得净化液；85.(3)净化：取固相萃取柱c18并依次用5ml乙腈和5ml纯净水预淋，取净化液上样，再用2.5ml30％乙腈水溶液淋洗，最后用2.5ml乙腈洗脱，收集洗脱液，过0.22μm滤膜，得待测物；86.(4)测定：采用超高效液相色谱-质谱/质谱联用仪检测。本实施例的测定条件与实施例1相同。87.测定结果：通过以上步骤测定土壤中环磺酮的含量为1.69mg/kg。88.实施例1-6的环磺酮的含量值以及回收率如下表：[0089] 实施例1实施例2实施例3实施例4实施例5实施例6助提剂水甲酸盐酸氨水氢氧化钠氨水测定值mg/kg1.711.621.751.921.281.69回收率％85.58187.5966484.5[0090]实施例1-6结果分析：通过上述实施例1-4可知在步骤(1)的提取操作中，相比于乙腈水溶液、加了甲酸的乙腈水溶液、加了盐酸的乙腈水溶液而言，使用含有氨水的乙腈水溶液时土壤中环磺酮的提取率更高。出现上述结果的原因是，环磺酮的pka值为3.18，相比于酸性环境，弱碱氨水的加入使土壤中的环磺酮成离子状态，离子状态下土壤对环磺酮的吸附作用减弱，环磺酮能够充分溶于提取液中并被完全提取出来。实施例5是将含有强碱氢氧化钠的乙腈水溶液添加至土壤中，虽然其具备弱碱氨水相同的提取作用，但是氢氧化钠的强碱性会导致环磺酮的降解，影响环磺酮的提取效果。上表为添加不同助提剂时测定出的土壤中环磺酮的含量值以及回收率，通过实施例1-5以及上表中的环磺酮的含量值以及回收率可知，在步骤(1)提取时使用氨水作为助提剂效果最佳。[0091]同时，通过对比实施例4和实施例6的环磺酮含量值以及回收率可知，实施例4的步骤(1)为最优提取条件，即当环境样品为土壤时，样品质量和氨水体积、乙腈体积的比例为1g：0.1ml：4ml为最优提取配比。[0092]实施例7[0093]本实施例提供了一种环境样品中环磺酮残留量检测方法，本实施例的环境样品为沉积物，包括以下步骤：[0094](1)提取：称取10.0g沉积物样品(精确至0.01g)，置于150ml三角瓶中，加入2.0ml氨水和40ml乙腈，振荡30min后抽滤，滤液转入装有8g氯化钠的100ml具塞量筒中，滤渣返回到原三角瓶中再加入40ml乙腈振荡30min后抽滤，合并两次的滤液于具塞量筒中，剧烈振摇约1min，静置分层，然后吸取10ml乙腈层置于平底烧瓶中，在40℃条件下旋转蒸发至干，氮气吹干，得提取物；[0095](2)复溶：在装有提取物的平底烧瓶中依次加入5.0ml20％乙腈水溶液和0.1ml甲酸，超声溶解，得净化液；[0096](3)净化：取固相萃取柱c18并依次用5ml乙腈和5ml纯净水预淋，取净化液上样，再用2.5ml50％乙腈水溶液淋洗，最后用2.5ml乙腈洗脱，收集洗脱液，过0.22μm滤膜，得待测物；[0097](4)测定：采用超高效液相色谱-质谱/质谱联用仪检测。本实施例的测定条件与实施例1相同。[0098]测定结果：通过以上步骤测定沉积物中环磺酮的含量为2.04mg/kg。[0099]实施例8[0100]本实施例提供了一种环境样品中环磺酮残留量检测方法，本实施例的环境样品为沉积物，包括以下步骤：[0101](1)提取：称取10.0g沉积物样品(精确至0.01g)，置于150ml三角瓶中，加入2.0ml氨水和40ml乙腈，振荡30min后抽滤，滤液转入装有8g氯化钠的100ml具塞量筒中，滤渣返回到原三角瓶中再加入40ml乙腈振荡30min后抽滤，合并两次的滤液于具塞量筒中，剧烈振摇约1min，静置分层，然后吸取10ml乙腈层置于平底烧瓶中，在40℃条件下旋转蒸发至干，氮气吹干，得提取物；[0102](2)复溶：在装有提取物的平底烧瓶中依次加入5.0ml20％乙腈水溶液，超声溶解，得净化液；[0103](3)净化：取固相萃取柱c18并依次用5ml乙腈和5ml纯净水预淋，取净化液上样，再用2.5ml50％乙腈水溶液淋洗，最后用2.5ml乙腈洗脱，收集洗脱液，过0.22μm滤膜，得待测物；[0104](4)测定：采用超高效液相色谱-质谱/质谱联用仪检测。本实施例的测定条件与实施例1相同。[0105]测定结果：通过以上步骤测定沉积物中环磺酮的含量为1.02mg/kg。[0106]实施例9[0107]本实施例提供了一种环境样品中环磺酮残留量检测方法，本实施例的环境样品为水样，包括以下步骤：[0108](1)提取：量取10.0ml水样，置于装有8g氯化钠的100ml具塞量筒中，加入40ml乙腈，剧烈振摇具塞量筒，静置分层，吸取10ml乙腈于平底烧瓶中，在40℃水中浓缩得到提取物；[0109](2)复溶：在装有提取物的平底烧瓶中依次加入5.0ml20％乙腈水溶液和0.1ml甲酸，得到净化液；[0110](3)净化：取固相萃取柱c18并依次用5ml乙腈和5ml纯净水预淋，取净化液上样，再用2.5ml30％乙腈水溶液淋洗，最后用2.5ml乙腈洗脱，收集洗脱液，过0.22μm滤膜，得待测物；[0111](4)测定：采用超高效液相色谱-质谱/质谱联用仪进行检测。本实施例的测定条件与实施例1相同。[0112]测量结果：通过以上步骤测定水中环磺酮的含量为1.95mg/l。[0113]实施例10[0114]本实施例提供了一种环境样品中环磺酮残留量检测方法，本实施例的环境样品为水样，包括以下步骤：[0115](1)提取：量取10.0ml水样，置于装有8g氯化钠的100ml具塞量筒中，加入40ml乙腈，剧烈振摇具塞量筒，静置分层，吸取10ml乙腈于平底烧瓶中，在40℃水中浓缩得到提取物；[0116](2)复溶：在装有提取物的平底烧瓶中依次加入5.0ml20％乙腈水溶液，得到净化液；[0117](3)净化：取固相萃取柱c18并依次用5ml乙腈和5ml纯净水预淋，取净化液上样，再用2.5ml30％乙腈水溶液淋洗，最后用2.5ml乙腈洗脱，收集洗脱液，过0.22μm滤膜，得待测物；[0118](4)测定：采用超高效液相色谱-质谱/质谱联用仪进行检测。本实施例的测定条件与实施例1相同。[0119]测量结果：通过以上步骤测定水中环磺酮的含量为1.92mg/l。[0120]实施例11[0121]本实施例提供了一种环境样品中环磺酮残留量检测方法，本实施例的环境样品为水稻土，包括以下步骤：[0122](1)提取：称取20.0g土壤样品(精确至0.01g)，置于150ml三角瓶中，加入8ml水、2.0ml氨水和40ml乙腈，振荡30min后抽滤，滤液转入装有8g氯化钠的100ml具塞量筒中，滤渣返回到原三角瓶中再加入40ml乙腈振荡30min后抽滤，合并滤液于具塞量筒中，剧烈振摇约1min，静置分层，然后吸取10ml乙腈层置于平底烧瓶中，在40℃条件下旋转蒸发至干，氮气吹干得提取物；[0123](2)复溶：在装有提取物的平底烧瓶中依次加入5.0ml20％乙腈水溶液和0.1ml甲酸，超声溶解，得净化液；[0124](3)净化：取固相萃取柱c18并依次用5ml乙腈和5ml纯净水预淋，取净化液上样，再用2.5ml30％乙腈水溶液淋洗，最后用2.5ml乙腈洗脱，收集洗脱液，过0.22μm滤膜，得待测物；[0125](4)测定：采用超高效液相色谱-质谱/质谱联用仪检测。本实施例的测定条件与实施例1相同。[0126]测定结果：通过以上步骤测定土壤中环磺酮的含量为1.95mg/kg。[0127]实施例12[0128]本实施例提供了一种环境样品中环磺酮残留量检测方法，本实施例的环境样品为水稻土，包括以下步骤：[0129](1)提取：称取20.0g土壤样品(精确至0.01g)，置于150ml三角瓶中，加入8ml水、2.0ml氨水和40ml乙腈，振荡30min后抽滤，滤液转入装有8g氯化钠的100ml具塞量筒中，滤渣返回到原三角瓶中再加入40ml乙腈振荡30min后抽滤，合并滤液于具塞量筒中，剧烈振摇约1min，静置分层，然后吸取10ml乙腈层置于平底烧瓶中，在40℃条件下旋转蒸发至干，氮气吹干得提取物；[0130](2)复溶：在装有提取物的平底烧瓶中加入5.0ml20％乙腈水溶液，超声溶解，得净化液；[0131](3)净化：取固相萃取柱c18并依次用5ml乙腈和5ml纯净水预淋，取净化液上样，再用2.5ml30％乙腈水溶液淋洗，最后用2.5ml乙腈洗脱，收集洗脱液，过0.22μm滤膜，得待测物；[0132](4)测定：采用超高效液相色谱-质谱/质谱联用仪检测。本实施例的测定条件与实施例1相同。[0133]测定结果：通过以上步骤测定土壤中环磺酮的含量为《0.05mg/kg。[0134]实施例13[0135]本实施例提供了一种环境样品中环磺酮残留量检测方法，本实施例的环境样品为红壤，包括以下步骤：[0136](1)提取：称取20.0g土壤样品(精确至0.01g)，置于150ml三角瓶中，加入8ml水、2.0ml氨水和40ml乙腈，振荡30min后抽滤，滤液转入装有8g氯化钠的100ml具塞量筒中，滤渣返回到原三角瓶中再加入40ml乙腈振荡30min后抽滤，合并滤液于具塞量筒中，剧烈振摇约1min，静置分层，然后吸取10ml乙腈层置于平底烧瓶中，在40℃条件下旋转蒸发至干，氮气吹干得提取物；[0137](2)复溶：在装有提取物的平底烧瓶中依次加入5.0ml20％乙腈水溶液和0.1ml甲酸，超声溶解，得净化液；[0138](3)净化：取固相萃取柱c18并依次用5ml乙腈和5ml纯净水预淋，取净化液上样，再用2.5ml30％乙腈水溶液淋洗，最后用2.5ml乙腈洗脱，收集洗脱液，过0.22μm滤膜，得待测物；[0139](4)测定：采用超高效液相色谱-质谱/质谱联用仪检测。本实施例的测定条件与实施例1相同。[0140]测定结果：通过以上步骤测定土壤中环磺酮的含量为2.04mg/kg。[0141]实施例14[0142]本实施例提供了一种环境样品中环磺酮残留量检测方法，本实施例的环境样品为红壤，包括以下步骤：[0143](1)提取：称取20.0g土壤样品(精确至0.01g)，置于150ml三角瓶中，加入8ml水、2.0ml氨水和40ml乙腈，振荡30min后抽滤，滤液转入装有8g氯化钠的100ml具塞量筒中，滤渣返回到原三角瓶中再加入40ml乙腈振荡30min后抽滤，合并滤液于具塞量筒中，剧烈振摇约1min，静置分层，然后吸取10ml乙腈层置于平底烧瓶中，在40℃条件下旋转蒸发至干，氮气吹干得提取物；[0144](2)复溶：在装有提取物的平底烧瓶中加入5.0ml20％乙腈水溶液，超声溶解，得净化液；[0145](3)净化：取固相萃取柱c18并依次用5ml乙腈和5ml纯净水预淋，取净化液上样，再用2.5ml30％乙腈水溶液淋洗，最后用2.5ml乙腈洗脱，收集洗脱液，过0.22μm滤膜，得待测物；[0146](4)测定：采用超高效液相色谱-质谱/质谱联用仪检测。本实施例的测定条件与实施例1相同。[0147]测定结果：通过以上步骤测定土壤中环磺酮的含量为《0.05mg/kg。[0148]实施例15[0149]本实施例提供了一种环境样品中环磺酮残留量检测方法，本实施例的环境样品为潮土，包括以下步骤：[0150](1)提取：称取20.0g土壤样品(精确至0.01g)，置于150ml三角瓶中，加入8ml水、2.0ml氨水和40ml乙腈，振荡30min后抽滤，滤液转入装有8g氯化钠的100ml具塞量筒中，滤渣返回到原三角瓶中再加入40ml乙腈振荡30min后抽滤，合并滤液于具塞量筒中，剧烈振摇约1min，静置分层，然后吸取10ml乙腈层置于平底烧瓶中，在40℃条件下旋转蒸发至干，氮气吹干得提取物；[0151](2)复溶：在装有提取物的平底烧瓶中依次加入5.0ml20％乙腈水溶液和0.1ml甲酸，超声溶解，得净化液；[0152](3)净化：取固相萃取柱c18并依次用5ml乙腈和5ml纯净水预淋，取净化液上样，再用2.5ml30％乙腈水溶液淋洗，最后用2.5ml乙腈洗脱，收集洗脱液，过0.22μm滤膜，得待测物；[0153](4)测定：采用超高效液相色谱-质谱/质谱联用仪检测。本实施例的测定条件与实施例1相同。[0154]测定结果：通过以上步骤测定土壤中环磺酮的含量为1.73mg/kg。[0155]实施例16[0156]本实施例提供了一种环境样品中环磺酮残留量检测方法，本实施例的环境样品为潮土，包括以下步骤：[0157](1)提取：称取20.0g土壤样品(精确至0.01g)，置于150ml三角瓶中，加入8ml水、2.0ml氨水和40ml乙腈，振荡30min后抽滤，滤液转入装有8g氯化钠的100ml具塞量筒中，滤渣返回到原三角瓶中再加入40ml乙腈振荡30min后抽滤，合并滤液于具塞量筒中，剧烈振摇约1min，静置分层，然后吸取10ml乙腈层置于平底烧瓶中，在40℃条件下旋转蒸发至干，氮气吹干得提取物；[0158](2)复溶：在装有提取物的平底烧瓶中加入5.0ml20％乙腈水溶液，超声溶解，得净化液；[0159](3)净化：取固相萃取柱c18并依次用5ml乙腈和5ml纯净水预淋，取净化液上样，再用2.5ml30％乙腈水溶液淋洗，最后用2.5ml乙腈洗脱，收集洗脱液，过0.22μm滤膜，得待测物；[0160](4)测定：采用超高效液相色谱-质谱/质谱联用仪检测。本实施例的测定条件与实施例1相同。[0161]测定结果：通过以上步骤测定土壤中环磺酮的含量为《0.05mg/kg。[0162]实施例7-16的环磺酮的含量测定值和回收率如下表：[0163][0164]实施例7-16结果分析：对比实施例7和8，发现对于沉积物样品，步骤(2)中复溶时相比于单独使用5ml20％乙腈水溶液，选用5ml20％乙腈水溶液和0.1ml甲酸作为下一步骤的上样溶剂时对检测结果的影响较大；[0165]对比实施例9和10，发现对于水样，步骤(2)中复溶时相比于单独使用5ml20％乙腈水溶液，选用5ml20％乙腈水溶液和0.1ml甲酸作为下一步骤的上样溶剂时对检测结果的影响较小；[0166]对比实施例11和12、实施例13和14、实施例15和16，发现对于土壤样品，步骤(2)中复溶时相比于单独使用5ml20％乙腈水溶液，选用5ml20％乙腈水溶液和0.1ml甲酸作为下一步骤的上样溶剂时对检测结果的影响非常大；[0167]说明在复溶时使用5ml20％乙腈水溶液和0.1ml甲酸有利于沉积物和土壤样品的溶出和后续净化，尤其是针对土壤样品，后续上样净化效果更佳。[0168]其次，收集实施例7-16步骤(3)中的净化液上样后并测定，发现实施例7、9、10、11、13、15的净化液上样后未检测到环磺酮，而实施例8、12、14、16净化液上样后检出80％～90％的环磺酮，说明实施例8、12、14、16的环磺酮未被固相萃取小柱保留。[0169]出现上述结果是因为，一般来说环境水样相对干净些，沉积物和土壤基质相对“杂”一些，所以不同环境样品中的共提取物差异较大，导致其对环磺酮固相萃取净化的影响存在显著差异。复溶时甲酸的加入有助于环磺酮在固相萃取小柱的保留，尤其是在共提取物干扰大时，上样溶剂中甲酸的添加对其在固相萃取柱上的保留起到了关键作用，环磺酮的pka值为3.18，弱酸的加入使得溶液中环磺酮绝大部分成分子状态，增强了其在固相萃取小柱上保留，也有利于后续步骤中选取不用极性的乙腈水溶淋洗杂质，解决了基质干扰的问题，达到较好的净化效果，最大程度降低共提取杂质对准确定性、定量分析的影响。净化材料的选择及过柱条件优化[0170]本次优化实验主要针对步骤(3)中净化材料的选取和过柱条件，且均采用样品中环磺酮添加浓度为2.0mg/kg或mg/l进行试验，选用实施例4的实施条件进行试验。[0171]首先，试验中选取了酸性氧化铝、中性氧化铝、碱性氧化铝和弗罗里硅土净化材料，自制了填充净化玻璃柱子，并测定了石油醚/丙酮、石油醚/乙酸乙酯和乙腈/水这三种洗脱体系下它们对环磺酮的保留吸附能力，具体结果见下表。[0172]不同净化材料对环磺酮的回收率表：[0173][0174][0175]从上表可知，上述净化材料中酸性氧化铝净化材料对环磺酮保留很强，石油醚/丙酮、石油醚/乙酸乙酯和乙腈/水这三种洗脱体系均没有淋洗出环磺酮，不同比例的试剂体系的过柱回收率均为0；中性氧化铝、碱性氧化铝和弗罗里硅土三种净化材料对环磺酮保留也较强，石油醚/丙酮和石油醚/乙酸乙酯洗脱体系很难淋洗出环磺酮，不同比例的试剂体系的过柱回收率均为0，只有在乙腈/水淋洗体系下能淋洗出环磺酮，但自制填充柱的稳定性不够，故还选取了c18作为净化材料的固相萃取小柱进行过柱试验。[0176]其次，下一步试验选择了6种不同品牌的c18净化材料进行对比，6种c18净化材料以a-f柱命名，a-f柱的型号和生产厂家分别是waters hlb(60mg/3ml，美国waters公司)、dikama proelut c18(500mg/6ml，北京迪马科技有限公司)、agela cleanert s c18-spe(500mg/6ml，天津博纳艾杰尔公司)、agela cleanert s c18-n-spe(500mg/6ml，天津博纳艾杰尔公司)、besep c18-h octadecyl modified silica(17％carbon icad)(500mg/6ml，振翔公司)和spe-ed spe c18/18％(500mg/6ml，美国applied separations公司)。试验用洗脱体系为不同比例的乙腈水溶液，洗脱结果如图8。从图8中可知，除了f柱外，55.8％-88.8％的环磺酮在a-e柱的上样部分(20％乙腈水溶液)被淋出，没有环磺酮在f柱的上样部分(20％乙腈水溶液)被淋出，故可知f柱对环磺酮保留能力最强，有利于杂质的分离，后续有利于选取不同极性乙腈水溶液组合进行淋洗去除干扰杂质。[0177]再次，选择了f柱进行进一步的优化试验，使用20％(掺有2％甲酸)、30％、50％、60％、70％、80％、100％这7种不同比例的乙腈水溶液分别进行淋洗，并检测每一段的环磺酮，计算每段被淋出的回收率和累积回收率，结果见图9-10。从图9-10可见，20％(掺有2％甲酸)的乙腈水溶液和30％的乙腈水溶液均未能洗脱出环磺酮，但从50％的乙腈水溶液开始，环磺酮逐步被淋洗出，且大部分被50％乙腈水溶液淋出，淋到70％乙腈水溶液时，已有93.8％的环磺酮被淋出，淋到100％乙腈时，已有99.5％的环磺酮被淋出，接近100％，说明环磺酮已基本被完全淋出。根据实验结果，最终采用了20％乙腈水溶液(掺有2％甲酸)上样、30％乙腈水溶液淋洗去除杂质，最后用强极性的乙腈完全洗脱环磺酮，保证环磺酮的回收率。[0178]方法验证试验[0179]1、仪器：waters uplc-xevo tq-ms高效液相色谱串联质谱联用仪(美国waters公司)、ohaus sps402f电子天平(0.01g，美国奥豪斯)、ab104-s电子天平(0.0001g，梅特勒－托利多国际贸易(上海)有限公司)、r-201型旋转蒸发器(上海申胜生物技术有限公司)、dhz-da全温型大容器恒温振荡器(太仓市实验仪器设备厂)。[0180]2、试剂：乙腈(色谱纯，德国默克公司)、乙腈(色谱纯，德国默克公司)、乙腈(分析纯，上海凌峰化学试剂有限公司)、氨水(分析纯，杭州高晶精细化工有限公司)、氯化钠(分析纯，兰溪市屹达化工试剂有限公司)、甲酸(色谱纯，美国acs恩科化学试剂公司)、纯净水(杭州娃哈哈集团有限公司)、c18小柱(500mg/6ml，美国applied separations公司)。[0181]3、仪器分析条件[0182]液相条件[0183]色谱柱：waters acquitybeh c18(2.1×100mm，1.7μm)[0184]流动相：a相为乙腈，b相为0.1％甲酸水溶液[0185]梯度洗脱程序：0min，a为50％；1min，a为90％；3.5min，a为90％；4min，a为50％；5.0min，a为50％[0186]流速：0.20ml/min[0187]柱温：40℃[0188]进样体积：2.00μl[0189]质谱条件：电离方式为esi+，采用mrm多反应监测，毛细管电压为2.50kv，脱溶剂温度为400℃，脱溶剂气流量为800l/hr。定量*、定性离子对为441.0》261.8*，441.0》340.9。[0190]4、方法的线性关系[0191]准确称取98％环磺酮标准物质，用色谱纯乙腈配制得到100mg/l的标准储备液。用色谱乙腈稀释得到环磺酮系列标准工作溶液，浓度分别为0.0050、0.010、0.020、0.040、0.080、0.10mg/l。按上述仪器分析条件进样，以浓度-峰面积绘制环磺酮标准曲线，其回归方程为y＝103210.4967x-92.6439(r2＝0.9987)，其中y为环磺酮峰面积，x为标准溶液浓度。[0192]5、方法回收率和相对标准偏差[0193]分别在空白基质(ph4.0的缓冲液、ph7.0的缓冲液、ph9.0的缓冲液、运河水、西湖水)中添加2档浓度的环磺酮标准溶液，每档重复5次，在空白基质(潮土、红壤、水稻土、西湖沉积物、运河沉积物)中添加3档浓度的环磺酮标准溶液，每档重复5次，土壤按照实施例4的步骤处理、沉积物按照实施例7的步骤处理，水样按照实施例9的步骤处理。环境样品处理好后使用上述仪器方法进样测定回收率。环磺酮在水样中回收率及其变异系数如下表：[0194][0195]环磺酮在土壤和沉积物中回收率及其变异系数的结果如下表：[0196][0197]结果分析：由环磺酮在水样、土壤和沉积物中回收率及其变异系数的表格可知，水中环磺酮添加平均回收率为78.9％～93.9％，rsd为1.9％～8.7％，土壤中环磺酮添加平均回收率为81.7％～99.5％，rsd为1.9％～7.9％，沉积物中环磺酮添加平均回收率为75.8％～84.0％，rsd为2.5％～9.2％；本方法全部采用溶剂标样计算，上述回收率计算结果均符合农药残留分析检测要求，不存在明显的基质效应，证明了本方法有较好的回收率和重复性，且优于quechers方法；同时通过上述回收率可知本方法使用在土壤样品中回收率最高，变异系数最小，应用于土壤样品中的测定效果最好，精确度更高。本发明方法线性范围0.005～0.1mg/l，以3倍信噪比计算最低检测限，以10倍信噪比计算定量限，最低检测限为0.00002mg/kg或mg/l，定量限为0.00007mg/kg或mg/l。[0198]结合图1至图7，图1为标准溶液(0.005mg/l)的液相图谱，图2为空白水样的液相图谱，图3为水样添加回收(0.05mg/l)的液相质谱，通过图1-图3可看出，空白样品色谱图干扰少，响应值本底低(《6.266e+002)；图4为土壤空白样的液相图谱，图5为红壤土添加回收(0.05mg/kg)的液相图谱，通过图4-图5可知，空白样品色谱图干扰少，响应值本底低(《6.670e+002)；图6为沉积物空白样的液相图谱，图7为西湖沉积物添加回收(0.05mg/kg)的液相图谱，通过图6和图7可知，空白样品色谱图干扰少，响应值本底低(《1.124e+003)，本方法能够应用于水样、沉积物和土壤，说明本发明通用性强，准确度高、稳定性好、数据精确度高。[0199]虽然本发明披露如上，但本发明并非限定于此。任何本领域技术人员，在不脱离本发明的精神和范围内，均可作各种更动与修改，因此本发明的保护范围应当以权利要求所限定的范围为准。









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