饮食品的制作方法 专利技术说明

食品,饮料机械,设备的制造及其制品加工制作,储藏技术ch2-、-ch＝、或-c(＝o)-，y表示-ch2-、-ch＝或-c(＝o)-，16.[化学式2][0017][0018]所示的键表示单键或双键。]。[0019]本发明的饮食品含有1ppm以上的化合物(i)，因此对乳酸菌及/或平酸菌显示出抗菌活性，能够抑制由乳酸菌及/或平酸菌的混入导致的饮食品的品质下降。[0020]化合物(i)优选为选自由甘草西定、甘草宁i、8-(γ,γ-二甲基烯丙基)-怀特酮、甘草香豆素、粗毛甘草素c、格里西轮、异黄酮a(isoangustone a)及甘草芳香豆素组成的组中的至少1种。[0021]本发明的饮食品可以为液体调味料或食品。另外，上述液体调味料可以为酱油、鲜汁汤(日文：だし)、汤汁(日文：つゆ)、佐料汁(日文：たれ)、调味品(dressing)或烹饪醋(日文：調理酢)，上述食品可以为浅渍。[0022]另外，本发明提供含有化合物(i)作为有效成分的针对乳酸菌及/或平酸菌的抗菌剂。[0023]另外，本发明提供抑制饮食品中的乳酸菌及/或平酸菌的增殖的方法，其包括将前述饮食品中的化合物(i)的总浓度调节为1ppm以上。[0024]发明效果[0025]根据本发明，能够提供可抑制由乳酸菌及/或平酸菌的混入导致的品质下降的饮食品。另外，根据本发明，能够提供针对乳酸菌及/或平酸菌的新型抗菌剂。另外，根据本发明，能够提供抑制饮食品中的乳酸菌及/或平酸菌的增殖的方法。具体实施方式[0026]以下，对本发明的优选实施方式详细地进行说明。但，本发明不限于以下的实施方式。[0027]本实施方式涉及的饮食品含有1ppm以上的由下述通式(i)表示的化合物，[0028][化学式3][0029][0030][式中，r1及r3各自独立地表示氢原子或c3-6烯基，r2及r4各自独立地表示氢原子或c1-4烷基，r5及r7各自独立地表示氢原子或羟基，r6表示氢原子或c2-6烯基，x表示连接键、-ch2-、-ch＝或-c(＝o)-，y表示-ch2-、-ch＝或-c(＝o)-，[0031][化学式4][0032][0033]所示的键表示单键或双键。]。[0034]本说明书中，“c1-4烷基”是指碳原子数1～4的直链或支链的烷基。作为c1-4烷基，例如，可举出甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基。[0035]本说明书中，“c2-6烯基”是指碳原子数2～6的直链或支链的烯基。作为c2-6烯基，例如，可举出乙烯基、丙烯-1-基、丙烯-2-基、1-丁烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、1-甲基-1-丙烯基、2-甲基-1-丙烯基、1-戊烯基、2-戊烯基、3-戊烯基、4-戊烯基、5-戊烯基、1-甲基-1-丁烯基、2-甲基-1-丁烯基、3-甲基-1-丁烯基、4-甲基-1-丁烯基、1-甲基-2-丁烯基、2-甲基-2-丁烯基、3-甲基-2-丁烯基、4-甲基-2-丁烯基、1-甲基-3-丁烯基、2-甲基-3-丁烯基、3-甲基-3-丁烯基、4-甲基-3-丁烯基、1,2-二甲基-1-丙烯基、1,1-二甲基-2-丙烯基、1-己烯基、2-己烯基、3-己烯基、4-己烯基、5-己烯基、6-己烯基等。[0036]上述通式(i)中，r1优选为氢原子、3-甲基-2-丁烯基或1,1-二甲基-2-丙烯基。[0037]上述通式(i)中，r2优选为氢原子或甲基。[0038]上述通式(i)中，r3优选为氢原子或3-甲基-2-丁烯基。[0039]上述通式(i)中，r4优选为氢原子或甲基。[0040]上述通式(i)中，r6优选为氢原子或3-甲基-2-丁烯基。[0041]化合物(i)中可存在立体异构体、互变异构体等异构体。这些异构体也包括在本发明的范围内。[0042]作为化合物(i)的具体例，可举出甘草西定、甘草宁i、8-(γ,γ-二甲基烯丙基)-怀特酮、甘草香豆素、粗毛甘草素c、格里西轮、异黄酮a、甘草芳香豆素。[0043]甘草西定也称为4-[(r)-7-羟基-5-甲氧基-6-(3-甲基-2-丁烯基)色原烷-3-基]-2-(3-甲基-2-丁烯基)-1,3-苯二醇，是由下式表示的已知化合物：[0044][化学式5][0045][0046]甘草宁i也称为5-(3-甲基-2-丁烯基)-2-(2,4-二羟基苯基)-4，6-二甲氧基苯并呋喃，是由下式表示的已知化合物：[0047][化学式6][0048][0049]8-(γ,γ-二甲基烯丙基)-怀特酮也称为6,8-双(3-甲基-2-丁烯基)-3-(4-羟基苯基)-5,7-二羟基-4h-1-苯并吡喃-4-酮，是由下式表示的已知化合物：[0050][化学式7][0051][0052]甘草香豆素也称为3-(2,4-二羟基苯基)-7-羟基-5-甲氧基-6-(3-甲基-2-丁烯基)-2h-1-苯并吡喃-2-酮，是由下式表示的已知化合物：[0053][化学式8][0054][0055]粗毛甘草素c也称为(3r)-3β(2,4-二羟基苯基)-5-甲氧基-6-(3-甲基-2-丁烯基)-3,4-二氢-2h-1-苯并吡喃-7-醇，是由下式表示的已知化合物：[0056][化学式9][0057][0058]格里西轮也称为3-(2,4-二羟基苯基)-5,7-二甲氧基-6-(3-甲基-2-丁烯基)-2h-1-苯并吡喃-2-酮，是由下式表示的已知化合物：[0059][化学式10][0060][0061]异黄酮a也称为3-[3,4-二羟基-5-(3-甲基-2-丁烯基)苯基]-5,7-二羟基-6-(3-甲基-2-丁烯基)-4h-色烯-4-酮，是由下式表示的已知化合物：[0062][化学式11][0063][0064]甘草芳香豆素也称为3-(2,4-二羟基苯基)-7-羟基-5-甲氧基-8-(2-甲基-3-丁烯-2-基)香豆素，是由下式表示的已知化合物：[0065][化学式12][0066][0067]化合物(i)可以为利用本领域技术人员已知的方法合成的物质，也可以为市售品。需要说明的是，已知甘草西定、甘草宁i、8-(γ,γ-二甲基烯丙基)-怀特酮、甘草香豆素、粗毛甘草素c、格里西轮、异黄酮a及甘草芳香豆素为甘草油性提取物中包含的化合物。因此，本实施方式涉及的饮食品中，也可以直接使用含有化合物(i)的甘草油性提取物，也可以使用将甘草油性提取物中包含的化合物(i)分离而得的物质。[0068]本实施方式涉及的饮食品可以仅含有1种化合物(i)，也可以含有2种以上的化合物(i)。需要说明的是，本实施方式涉及的饮食品含有2种以上的化合物(i)的情况下，化合物(i)的浓度是指将各化合物的浓度相加而得的浓度。[0069]本实施方式涉及的饮食品中，化合物(i)的浓度的下限为1ppm以上即可。由此，能够抑制由乳酸菌及/或平酸菌的混入导致的饮食品的品质下降。需要说明的是，化合物(i)的浓度可以根据饮食品的用途、食盐浓度、醇浓度、ph等在1ppm以上的范围内适当设定，从进一步提高针对乳酸菌及/或平酸菌的抗菌活性的观点考虑，例如，可以为5ppm以上，可以为10ppm以上，可以为25ppm以上，可以为50ppm以上。[0070]本实施方式涉及的饮食品中，化合物(i)的浓度的上限没有特别限制，从充分地溶解于作为对象的饮食品中的观点考虑，例如，可以为10000ppm以下。[0071]化合物(i)的浓度例如可利用液相色谱·串联质谱法(lc/ms/ms)测定。[0072]本实施方式涉及的饮食品只要为含有1ppm以上的化合物(i)的饮食品，则可以没有特别限制地为任意的饮食品。作为本实施方式涉及的饮食品，例如，可举出酱油、鲜汁汤、汤汁、佐料汁、汤(soup)、调味汁(sauce)、调味品等液体调味料；味噌汤、蛋黄酱等半固体状调味料；梅干、咸菜、副食等。从能够更进一步抑制由乳酸菌及/或平酸菌污染导致的品质下降的观点考虑，本实施方式涉及的饮食品优选为液体调味料或食品。液体调味料中，优选酱油、鲜汁汤、汤汁、佐料汁、调味品或烹饪醋。食品中，优选浅渍。[0073]本实施方式涉及的饮食品的食盐浓度没有特别限制，从在不增加食盐的量的情况下提高对乳酸菌及/或平酸菌的抗菌活性的观点考虑，例如，食盐浓度可以为12％(w/v)以下、8％(w/v)以下、4％(w/v)以下、或0％(w/v)(无盐)。[0074]食盐浓度例如可以利用电位滴定法、莫尔法、原子吸收分光光度法等已知的方法测定。[0075]本实施方式涉及的饮食品的醇浓度没有特别限制，从在不增加醇的量的情况下提高对乳酸菌及/或平酸菌的抗菌活性的观点考虑，例如，可以为10％(v/v)以下、5％(v/v)以下、或0％(v/v)。[0076]醇浓度例如可利用气相色谱法测定。[0077]本实施方式涉及的饮食品的ph没有特别限制，从使饮食品的呈味良好的观点考虑，例如，可以为3.0以上、4.0以上、或4.2以上，可以为7.0以下、6.0以下、或5.8以下。[0078]本实施方式涉及的饮食品例如可通过下述方式制造：向作为基底的饮食品(优选为液体调味料或食品)中，以成为1ppm以上的浓度的方式添加包含化合物(i)的甘草油性提取物或化合物(i)，根据需要进行稀释、浓缩(脱气、加热、干燥、减压下的加热·脱气等)、各种添加物的添加等。[0079]如以下的实施例中所确认的，化合物(i)对乳酸菌及/或平酸菌显示出抗菌作用。因此，作为本发明的一个实施方式，提供含有化合物(i)作为有效成分的针对乳酸菌及/或平酸菌的抗菌剂。[0080]本实施方式涉及的抗菌剂可以对各种有害乳酸菌(例如，乳杆菌属、链球菌属、乳球菌属等中包含的乳酸菌)、平酸菌(例如，凝结芽孢杆菌等)使用。[0081]本实施方式涉及的抗菌剂可以为固体(例如，粉末)、液体(例如，溶液或悬浮液)、糊剂等任意形态。另外，可以为散剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、液体制剂、悬浮剂、糖浆剂等任意剂型。需要说明的是，上述的各种制剂可以通过将甘草西定、与添加剂(赋形剂、粘合剂、润滑剂、崩解剂、乳化剂、表面活性剂、基质、助溶剂、助悬剂等)混合、并根据需要进行成型而制备。[0082]本实施方式涉及的抗菌剂可以添加于任意的饮食品中而使用。作为这样的饮食品，例如，可举出酱油、鲜汁汤、汤汁、佐料汁、汤、调味汁、调味品、烹饪醋等液体调味料；味噌汤、蛋黄酱等半固体状调味料；梅干、咸菜、副食等。[0083]另外，如以下的实施例中所确认的，化合物(i)显示出抑制乳酸菌及/或平酸菌增殖的作用。因此，作为本发明的一个实施方式，提供抑制饮食品中的乳酸菌及/或平酸菌增殖的方法，所述方法包括将前述饮食品中的化合物(i)的总浓度调节为1ppm以上。[0084]实施例[0085]以下，基于实施例来更具体地说明本发明。但是，本发明不受以下的实施例限定。[0086]〔试验例1：食用植物提取物对乳酸菌的抗菌作用〕[0087](提取物的制备)[0088]向将市售的食用植物(记载于表1及2中)的叶、茎或根粉碎而得的粉碎物中，加入与粉碎物等量的灭菌水，利用漩涡振荡器进行搅拌混合，于室温静置1小时。向该混合物中添加灭菌水的3倍量的乙醇，在培育箱中以50℃、120rpm(往复振荡)的条件进行3小时提取，得到75％乙醇提取液。将该提取液以3000rpm离心处理10分钟，得到各提取物。[0089](酱油的制备)[0090]用灭菌水将市售低盐酱油(kikkoman corporation制)稀释2倍，利用氢氧化钠将ph调节为4.8，进行加热杀菌，制备了试验用低盐酱油。[0091](抗菌作用的评价)[0092]向试验管中以最终浓度成为105cfu/ml左右的方式添加试验用低盐酱油11.3ml、各提取物0.7ml及乳酸菌(lactobacillus rennini及lactobacillus acidipiscis)，塞上硅胶塞，于30℃静置来进行厌氧培养。由于乳酸菌增殖时会产生菌体的沉淀，因此，对试验管底部经时地产生的沉淀进行观察，将对照组(代替提取物而加入有75％乙醇水溶液)与添加了各提取物的试验的直至产生沉淀的天数进行比较，实施抗菌作用的评价。将结果示于表1及2。[0093][表1][0094][0095][表2][0096][0097]〔试验例2：感官评价〕[0098]关于从香味和味道的观点考虑试验例1中观察到抗菌作用(与对照组相比，至增殖为止的天数相差7天以上)的19种提取物是否适合作为原材料，由1名训练过的评价员按照以下的评价基准实施感官评价。将结果示于表3。需要说明的是，表中，关于使用部位，分别地，1表示种子(种皮)或果实(果皮)，2表示叶、茎、花或枝干，3表示根。[0099]评价基准[0100]○：适合作为原材料[0101]δ：不太适合作为原材料[0102]×：明显不适合作为原材料[0103]-：未评价[0104][表3][0105]原材料使用部位香味味道综合评价莳萝1δ‑×鸭儿芹1δ‑×旱芹1δ‑×生姜末3○δδ龙蒿/狭叶青蒿2○δδ莳萝籽1δ‑×小豆蔻1×‑×葛缕子1δ‑×银杏(草本茶)2δ‑×生姜(草本茶)3○δδ薄荷(草本茶)2δ‑×生姜(粉末)3○δδ独活(未加工·地上部分)2δ‑×甜罗勒(冻干)2×‑×柠檬皮1δ-δ生姜粉末3○δδ白术2δ‑×春郁金粉末3δ‑×甘草末3○○○[0106]根据表3，甘草末的提取物在综合评价中被评价为最适合作为原材料。另外，将该提取物以成为100ppm的方式添加于市售低盐酱油(kikkoman corporation制)中，由5名训练过的评价员对香味和味道实施感官评价，结果确认了其不损害低盐酱油的风味，适合作为原材料。[0107]〔试验例3：对乳酸菌具有抗菌作用的甘草末中的物质鉴定〕[0108](提取物的制备)[0109]在甘草末(日本粉末药品株式会社)1kg中加入5l氯仿(关东化学特级)，于室温搅拌2小时后，使用折叠滤纸(5c)进行过滤。使用蒸发仪使该滤液浓缩干固，得到11g的提取物。[0110](具有抗菌作用的物质的划分)[0111]将硅胶(disogel ir-60-40/63a cat.1002a)填充于柱(3l)中，使上述得到的提取物约11g溶解于约30ml氯仿中，依次使用以下的溶剂，一边利用流速40ml/分钟、220nm条件下的tlc分析进行监测，一边划分为13个级分(按洗脱顺序，记为a～m)。[0112]1)己烷(6l)[0113]2)己烷：乙酸乙酯＝4：1(10l)[0114]3)己烷：乙酸乙酯＝3：1(12l)[0115]4)己烷：乙酸乙酯＝2：1(10l)[0116](各级分的抗菌作用的评价)[0117]将各级分以成为200μg/ml、67μg/ml、22μg/ml或7μg/ml的方式添加于溴甲酚紫平板计数琼脂(nissui)。涂布1铂耳乳酸菌(lactobacillus rennini及lactobacillus acidipiscis；106～107cfu/ml)的菌液，于30℃进行8天厌氧培养，对乳酸菌的增殖抑制效果进行评价。评价是使用以下的式(1)算出各级分的抗菌性单元，根据求出的各级分的抗菌性单元，使用以下的式(2)算出对抗菌作用的贡献率。将结果示于表4。[0118]式(1)：各级分的抗菌性单元＝100/发挥抗菌作用的浓度×划分量[0119]式(2)：对抗菌作用的贡献率(％)＝(各级分的抗菌性单元/全部级分的抗菌性单元)×100[0120][表4][0121][0122]根据表4，在级分f及i中观察到强的抗菌作用，尤其是强烈推测级分i中含有甘草末中的主要抗菌成分。因此，为了鉴定级分i中包含的抗菌成分，实施13c-nmr波谱测定。其结果，推测该抗菌成分为甘草西定，与标准品(chemfaces公司制)的13c-nmr波谱比较，结果确认了两者一致。另外，对该抗菌成分实施tof(飞行时间型)质谱分析，结果确认了，与甘草西定同样地在m/z 425处显示出[m+h]+的峰。[0123]〔试验例4：甘草西定对液体调味料中的乳酸菌的抗菌作用(1)〕[0124](1)各液体调味料的制造[0125](酱油的制造)[0126]对市售的未加工大豆酱油(kikkoman corporation制)进行电渗析后，进行减压浓缩，由此制造了食盐浓度为0％(w/v)且醇浓度为0％(v/v)的酱油。接着，向上述得到的酱油中添加食盐及/或醇，然后进行加热处理，制造下述表5所示的食盐浓度及醇浓度的各酱油。需要说明的是，各酱油的ph为4.9～5.0。[0127][表5][0128][0129](鲣鱼汁的制造)[0130]使用下述表6所示的材料来制造鲣鱼汁。具体而言，用醇及水对鲣鱼干中包含的成分进行提取，在得到的提取液中配合砂糖、食盐及调味料，并进行加热，由此制造了鲣鱼汁。需要说明的是，得到的鲣鱼汁的食盐浓度为0.2％(w/v)，醇浓度为0.15％(v/v)，ph为6.1。[0131][表6][0132]原材料配合量鲣鱼千7.5g砂糖3.2g食盐2.0g调味料(氨基酸等)4.0g醇1.5ml水993ml合计1000ml[0133](佐料汁的制造)[0134]使用下述表7所示的材料来制造佐料汁。具体而言，将下述表7所示的量的浓口酱油(kikkoman corporation制)、细砂糖、马铃薯淀粉(日文：片粟粉)及水配合，并进行加热，由此制造了佐料汁。需要说明的是，得到的佐料汁的食盐浓度为5.3％(w/v)，醇浓度为0.8％(v/v)，ph为5.0。[0135][表7][0136]原材料配合量(g)浓口酱油354.6细砂糖121马铃薯淀粉20水504.4合计1000[0137](汤汁的制造)[0138]使用下述表8所示的材料来制造汤汁。具体而言，用水对鲣鱼干中包含的成分进行提取，在得到的提取液中配合浓口酱油(kikkoman corporation制)、砂糖及食盐，并进行加热，由此制造了汤汁。需要说明的是，得到的汤汁的食盐浓度为3％(w/v)，醇浓度为0.4％(v/v)，ph为5.5。[0139][表8][0140]原材料配合量浓口酱油105ml鲣鱼干31.3g砂糖40g食盐13.6g水888ml合计1000ml[0141](2)抗菌作用的评价[0142]向上述(1)中制造的各液体调味料中，以成为1ppm、5ppm、10ppm、25ppm及50ppm的浓度的方式添加甘草西定(chemfaces公司制)后，以成为106～107个/ml的方式分别添加下述表9中记载的乳酸菌，于30℃培养7天。培养后，使用gam琼脂培养基“nissui”来测定乳酸菌数，将未添加甘草西定的液体调味料作为对照组，与该对照组中的乳酸菌数比较，由此评价抗菌活性。需要说明的是，使用以下所示的基准进行评价。将结果示于表10～16。[0143](评价基准)[0144]a：菌数减少至小于对照组的10％[0145]b：菌数减少至对照组的10％以上且小于50％[0146]c：菌数减少至对照组的50％以上且小于100％[0147]d：菌数与对照组相同[0148][表9][0149]乳酸菌种名各种保藏机构idalactobacillus renninidsm 20253blactobacillus renninidsm 17732clactobacillus acidipiscisnbrc 102163dlactobacillus acidipiscisnbrc 102164[0150][表10][0151][0152]就食盐浓度为8％(w/v)以上且醇浓度为10％(v/v)的酱油而言，在对照组中，菌没有生长。需要说明的是，甘草西定的浓度为0.1ppm时，在所有试验条件下均未观察到抗菌活性。[0153][表11][0154][0155][表12][0156][0157][表13][0158][0159][表14][0160][0161][表15][0162][0163][表16][0164][0165]确认了甘草西定在各种食盐浓度及醇浓度的条件下对各种乳酸菌显示出抗菌活性。[0166]〔试验例5：甘草西定对液体调味料中的乳酸菌的抗菌作用(2)〕[0167](酱油的制造)[0168]对市售的未加工大豆酱油(kikkoman corporation制)进行电渗析后，进行减压浓缩，由此制造了食盐浓度为0％(w/v)且醇浓度为0％(v/v)的酱油。接着，向上述得到的酱油中添加食盐及/或醇后，加入盐酸或氢氧化钠水溶液而调节至所期望的ph。添加无菌纯化水后，进行加热处理，制造下述表17所示的食盐浓度、醇浓度及ph的各酱油。[0169](抗菌作用的评价)[0170]将甘草西定(chemfaces公司制)以成为1ppm、5ppm、10ppm、25ppm及50ppm的浓度的方式添加于得到的各酱油后，以成为106～107个/ml的方式各自添加乳酸菌(lactobacillus rennini(dsm20253))，于30℃培养7天。培养后，使用gam琼脂培养基“nissui”来测定乳酸菌数，将未添加甘草西定的酱油作为对照组，通过与该对照组中的乳酸菌数比较，评价抗菌活性。需要说明的是，使用与试验例4同样的基准进行评价。将结果示于表18及19。[0171][表17]20253))，于30℃培养7天。培养后，使用gam琼脂培养基“nissui”来测定乳酸菌数，将未添加试验物质的酱油作为对照组，通过与该对照组中的乳酸菌数比较，评价抗菌活性。需要说明的是，使用以下所示的基准进行评价。将结果示于表20。[0182](评价基准)[0183]a：菌数减少至小于对照组的10％[0184]b：菌数减少至对照组的10％以上且小于50％[0185]c：菌数减少至对照组的50％以上且小于100％[0186]d：菌数与对照组相同[0187]-：未评价[0188][表20][0189][0190]关于甘草西定以外的含氧杂环化合物，也确认了与甘草西定同样地具有抗菌活性。[0191]〔试验例7：含氧杂环化合物对液体调味料中的乳酸菌的抗菌作用(2)〕[0192](抗菌作用的评价)[0193]将表21中记载的各试验物质以成为0.1ppm、0.5ppm、1ppm、5ppm、25ppm及50ppm的浓度的方式添加于试验例6中制造的酱油中后，以成为104～105个/ml的方式各自添加乳酸菌(lactobacillus fructivores(nbrc 13954))，于30℃培养7天。培养后，使用difco lactobacilli mrs agar来测定乳酸菌数，将未添加试验物质的酱油作为对照组，通过与该对照组中的乳酸菌数比较，评价抗菌活性。需要说明的是，使用以下所示的基准进行评价。将结果示于表21。[0194](评价基准)[0195]a：菌数减少至小于对照组的10％[0196]b：菌数减少至对照组的10％以上且小于50％[0197]c：菌数减少至对照组的50％以上且小于100％[0198]d：菌数与对照组相同[0199][表21][0200][0201]关于甘草西定以外的含氧杂环化合物，也确认了与甘草西定同样地具有抗菌活性。[0202]〔试验例8：甘草西定对液体调味料中的平酸菌的抗菌作用〕[0203](汤汁的制造)[0204]使用下述表22所示的材料来制造汤汁。具体而言，用水对鲣鱼干中包含的成分进行提取，在得到的提取液中配合浓口酱油(kikkoman corporation制)、砂糖及食盐，进行加热，由此制造了汤汁。需要说明的是，得到的汤汁的食盐浓度为3％(w/v)，醇浓度为0.4％(v/v)，ph为5.2。[0205][表22][0206]原材料配合量浓口酱油105ml鲣鱼千31.3g砂糖40g食盐13.6g水888ml合计1000ml[0207](抗菌作用的评价)[0208]将甘草西定(chemfaces公司制)以成为1ppm、5ppm、10ppm、25ppm及50ppm的浓度的方式添加于上文制造的汤汁中后，以成为104～105个/ml的方式各自添加平酸菌(bacillus coagulans(ifo12714))，于45℃培养7天。将未添加甘草西定的汤汁作为对照，比较ph，由此评价抗菌活性。需要说明的是，使用以下所示的基准进行评价。将结果示于表23。[0209](评价基准)[0210]a：与对照相比，ph未变化[0211]b：与对照相比，ph下降[0212][表23][0213][0214]确认了甘草西定对平酸菌显示出抗菌活性。[0215]〔试验例9：甘草西定对液体调味料中及食品中的乳酸菌的抗菌作用(3)〕[0216](1)各液体调味料及食品的制造[0217](液状调味品的制造)[0218]使用下述表24所示的材料来制造液状调味品。具体而言，将下述表24所示的量的浓口酱油(kikkoman corporation制)、食醋、味醂、细砂糖、海带汁及水配合，进行加热，由此制造了液状调味品。需要说明的是，得到的液状调味品的食盐浓度为2.6％(w/v)，醇浓度为0.8％(v/v)，ph为4.2。[0219][表24][0220]原材料配合量(g)浓口酱油18.72食醋2.54味醂2.9细砂糖5海带汁16水54.84合计100[0221](浅渍的制造)[0222]使用下述表25所示的材料来制造浅渍用调味液。具体而言，将下述表25所示的量的淡口酱油(kikkoman corporation制)、食醋、玉米糖浆、异构化糖、食盐、细砂糖、谷氨酸钠(msg)、柠檬果汁、海带汁及水配合，进行加热，由此制造了浅渍用调味液。将白菜充分浸渍在该浅渍用调味液中，由此制造了浅渍。需要说明的是，得到的浅渍用调味液的食盐浓度为3.1％(w/v)，醇浓度为0.01％(v/v)，ph为4.4。[0223][表25][0224]原材料配合量淡口酱油0.3ml食醋0.5ml玉米糖浆15g异构化糖2g食盐3g细砂糖4gmsg0.4g柠檬果汁0.68g海带汁3.2ml水83.45ml合计100ml[0225](烹饪醋的制造)[0226]使用下述表26所示的材料来制造烹饪醋。具体而言，配合下述表26所示的量的食醋、食盐、细砂糖、柠檬果汁、谷氨酸钠(msg)及水，进行加热，由此制造烹饪醋。需要说明的是，得到的烹饪醋的食盐浓度为1.5％(w/v)，醇浓度为0％(v/v)，ph为3.8。[0227][表26][0228]原材料配合量食醋0.1ml食盐1.5g细砂糖10g柠檬果汁5.1gmsg0.4g水87.3ml合计100ml[0229](2)抗菌作用的评价[0230]向上述制造的液状调味品、浅渍及烹饪醋中，以成为1ppm、5ppm、10ppm、25ppm及50ppm的浓度的方式添加甘草西定后，以成为106～107个/ml的方式各自添加乳酸菌(lactobacillus rennini(dsm20253))，对于液状调味品及浅渍，于30℃培养7天，对于烹饪醋，于30℃培养3天。培养后，使用gam琼脂培养基“nissui”来测定乳酸菌数，将未添加甘草西定的液状调味品、浅渍及烹饪醋作为对照组，通过与该对照组中的乳酸菌数比较，评价抗菌活性。需要说明的是，使用与试验例4同样的基准进行评价。将结果示于表27。[0231](评价基准)[0232]a：菌数减少至小于对照组的10％[0233]b：菌数减少至对照组的10％以上且小于50％[0234]c：菌数减少至对照组的50％以上且小于100％[0235]d：菌数与对照组相同[0236][表27][0237][0238]确认了甘草西定在各种液体调味料及食品中对乳酸菌显示出抗菌活性。









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